Gemini人AB血清100-512

把細胞養(yǎng)好的三個關(guān)鍵要素是：良好的細胞來源，正確的實驗操作，以及合適的培養(yǎng)體系。其中“合適的培養(yǎng)體系”就是要創(chuàng)造適合細胞生長的環(huán)境，給細胞建立一個滿意的“家”，而胎牛血清就好比于這個家的裝修，可以提高細胞的居住環(huán)境和舒適性，讓細胞更好更快地生長

當(dāng)然，胎牛血清并不是完美的，它除了可為細胞提供生長所必須的蛋白、細胞因子、激素和微量元素等多種營養(yǎng)物質(zhì)，同時也含有內(nèi)毒素、補體、抗體等對細胞生長有危害的成分，若選擇不當(dāng)，不合適的FBS會嚴重影響細胞的生長狀態(tài)甚至導(dǎo)致細胞死亡。因此，F(xiàn)BS既是讓細胞快樂成長的*營養(yǎng)物，又是可能導(dǎo)致細胞死亡的“定時の炸的啊彈”！辛苦養(yǎng)起來的細胞可能因為FBS用錯而一切歸零……

近年來無血清培養(yǎng)基和非動物來源的培養(yǎng)基越來越受到關(guān)注，但目前大部分細胞還無法適用這些培養(yǎng)基，并且存在費用較高和細胞生長較緩慢的缺點，因此，含有FBS的*培養(yǎng)基仍然是目前主流的細胞培養(yǎng)體系。 

那么，應(yīng)如何為你的細胞選購FBS呢？選購FBS應(yīng)考慮哪些標準？

 1.產(chǎn)品檢測

每款FBS在生產(chǎn)上市之前，必須經(jīng)過嚴格的質(zhì)控檢測。

質(zhì)控環(huán)節(jié)*，以確保上市的血清符合規(guī)定合乎規(guī)格，而血清產(chǎn)品分析證書（COA）就是FBS質(zhì)控的重要體現(xiàn)。在COA中，常規(guī)的檢測指標包括內(nèi)毒素、總蛋白、細菌、病毒等，例如我國藥典規(guī)定，F(xiàn)BS中內(nèi)毒素含量應(yīng)≤10EU/mL，另外總蛋白為30-50mg/mL、血紅蛋白檢測不高于30mg/dL。

 2. 可追溯性

目前市面上存在較多以假亂真的FBS產(chǎn)品，科研工作者對血清的真實產(chǎn)地、來源難以鑒別。

血清行業(yè)協(xié)會（ISIA）實施了供應(yīng)鏈可追溯性的行業(yè)標準，以確保FBS的質(zhì)量和安全性。

例如，F(xiàn)BS供應(yīng)商是否保留原產(chǎn)地的可追溯記錄？是否持有血清生產(chǎn)各階段處理、運輸和商業(yè)交易的文件？這些都是判斷FBS可追溯性需要考慮的因素。

 3. 生長驗證

我們使用FBS目的是為了讓細胞更真實、健康地生長。在確保了FBS的來源真實性、安全可靠性后，下一步就要對FBS的質(zhì)量，即培養(yǎng)細胞的效果進行鑒定了，而這也是決定細胞能否養(yǎng)好的關(guān)鍵。

在細胞培養(yǎng)過程，質(zhì)量粗糙的FBS可能會導(dǎo)致細胞出現(xiàn)生長速度緩慢、不貼壁、容易老化等現(xiàn)象，從而導(dǎo)致實驗受阻。經(jīng)過質(zhì)量驗證的FBS，則可以十分確定這款FBS對哪些細胞具有良好的培養(yǎng)效果，進而判斷其能否把自己的細胞養(yǎng)好。對于質(zhì)量優(yōu)質(zhì)的FBS，通常采用血清敏感性細胞（如干細胞）來進行培養(yǎng)驗證，若培養(yǎng)效果良好，則其他常規(guī)細胞系的培養(yǎng)就更不在話下。

 4. 穩(wěn)定性

FBS作為其他行業(yè)的副產(chǎn)品，其生產(chǎn)在本質(zhì)上會受到天氣、食物供應(yīng)、經(jīng)濟條件和牛群規(guī)模及疫情等各種因素的影響，導(dǎo)致血清的供應(yīng)可能出現(xiàn)貨源、價格及批次間的不穩(wěn)定性，從而造成實驗的不順甚至實驗失敗。在過去，國內(nèi)外已有多個實驗室出現(xiàn)過因血清批間差異大而導(dǎo)致實驗結(jié)果無法重復(fù)的情況，浪費了巨大的時間和金錢成本。

因此，找到穩(wěn)定提供同批次FBS的供應(yīng)商，對于確保自己細胞實驗結(jié)果的真實性和可重復(fù)性具有重要意義，而且花在重復(fù)實驗或檢驗新批次上的時間將大大減少。

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實驗室操作中要注意及處理方法：

1. 血清保存: 建議血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。然而，若存放于4℃時，請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶，建議您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。

2. 解凍血清的方法: 建議您將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。

3. 血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理?
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后，也會存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的質(zhì)量。
若您欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因為它可能會阻塞您的過濾膜。

4. 為什么要熱滅活血清?
加熱可以滅活補體系統(tǒng)。激活的補體參與溶解細胞事件，刺激平滑肌收縮，細胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學(xué)研究，培養(yǎng)ES細胞，昆蟲細胞和平滑肌細胞時，推薦使用熱滅活血清。

5. Gemini血清有必要做熱滅活嗎?
實驗顯示，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清，對大多數(shù)的細胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進，或*沒有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量，而造成細胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清，沉淀物的形成會顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點”，常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會使此沉淀物更增多，使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。
因此我們建議您，若非必須，您可以不需要做熱處理這一步。如此一來，不但節(jié)省您寶貴的時間，更確保血清的質(zhì)量!

6. 為什么儲存在冰箱中的胎牛血清會出現(xiàn)沉淀?
胎牛血清沒有預(yù)老化，儲存在2－8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白（如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等）可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應(yīng)該不會影響血清的質(zhì)量。推薦在－20℃儲存胎牛血清，避免反復(fù)凍融。
7. 如何避免沉淀物的產(chǎn)生?

解凍Gemini血清時，請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)，若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃)，實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。
解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。
請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。
血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。
若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多