Bst DNA 聚合酶大片段是將缺少5' →3' 外切核酸酶結(jié)構(gòu)域的Bacillusstearothermophilus（嗜熱脂肪芽孢桿菌）DNA 聚合酶基因在E.coli 中表達(dá)純化而得，它具有下列特點(diǎn)：

1. 5′→3′DNA 聚合酶活性，但不具有5′→3′外切核酸酶活性，因此沒(méi)有糾錯(cuò)功能。

2. 嗜溫性，適反應(yīng)溫度為68℃，建議反應(yīng)溫度不要超過(guò)70 ℃。

3. 強(qiáng)鏈置換能力，可以用于DNA 鏈置換反應(yīng)和LAMP 擴(kuò)增。還可用于68℃DNA 測(cè)序（該條件尤其適用于富含GC 的模板和納克級(jí)的模板）。

4. 不能用于熱循環(huán)測(cè)序或PCR，80℃ 10 分鐘即可失活。

低溫運(yùn)輸，-20℃保存、有效期一年。*貯存需補(bǔ)加100 μg/mL BSA 或0.1% Triton X-100。

1×Bst DNA 聚合酶Buffer 的組成：

20 mM Tris-HCl (pH 8.8 @ 25 ℃ ), 10 mM KCl, 10 mM(NH4)2SO4, 2 mM MgSO4, 0.1% Triton X-100

活性定義及檢測(cè)條件

1 U 指65℃條件下，30 分鐘內(nèi)使10 nmoL 的dNTP 摻入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。活性檢測(cè)條件為：50 mM KCl, 20 mM Tris-HCl (pH8.8),10 mM MgCl2, 30 nM M13mp18 ssDNA, 70 nM M13 測(cè)序引物

(-47) 24 mer, 200 μM dATP, 200 μM dCTP,200 μM dGTP, 100 μM[3H] dTTP, 100 μg/mL BSA 和酶，65℃溫育。

貯存條件

50 mM KCl, 10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 1 mM DTT, 0.1 mMEDTA, 0.1% Triton X-100 和50%甘油，貯存于-20℃。