集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)及品牌代理為一體的生物技術(shù)公司,目前可提供各種抗體、免疫學(xué)相關(guān)的檢測試劑盒、胎牛血清,動物抗血清等高品質(zhì)產(chǎn)品及服務(wù),涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)領(lǐng)域。
CAS | 原裝,質(zhì)量問題包退換 | 純度 | 99.5% |
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分子量 | 咨詢 | 分子式 | 咨詢 |
供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 48/96 |
貨號 | 70296 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研實(shí)驗(yàn) |
目的:本實(shí)驗(yàn)為了證明心肌細(xì)胞是兒茶酚胺誘導(dǎo)產(chǎn)生的β-半乳糖苷酶的一個重要來源,從而為抗炎以及抗心肌纖維化提供新的藥物靶點(diǎn). 方法:用逆轉(zhuǎn)錄PCR檢測在成年大鼠心室肌細(xì)胞,新生鼠心肌成纖維細(xì)胞及巨噬細(xì)胞系RAW264.7中β-半乳糖苷酶mRNA的表達(dá).用X-gal和鼠β-GALELISA試劑盒檢測異丙腎上腺素刺激后的不同細(xì)胞,血清和心臟組織勻漿物中β-半乳糖苷酶的表達(dá).用異丙腎上腺素誘導(dǎo)造心肌炎癥和心肌纖維化模型.蘇木精-伊紅染色和天狼星紅染色觀察組織學(xué)變化,同時用X-gal觀察組織學(xué)β-半乳糖苷酶的表達(dá). 結(jié)果:以B淋巴細(xì)胞系DT40做陽性對照...
猴β-半乳糖苷酶(β-GAL)elisa試劑盒目的:構(gòu)建調(diào)控β-半乳糖苷酶(β-gal)基因表達(dá)的四環(huán)素基 因表達(dá)調(diào)控載體,驗(yàn)證其在肝癌細(xì)胞內(nèi)調(diào)控β-半乳糖苷酶基因的表達(dá),為進(jìn)一步利用該調(diào)控系統(tǒng)調(diào)控治療基因治療肝癌奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ).方法:根據(jù)2個四環(huán)素調(diào)控 子結(jié)合位點(diǎn)(TetO2)基因與pcDNA3.1載體的基因核苷酸序列,設(shè)計(jì)引物,以pcDNA3.1載體為模板進(jìn)行PCR.將具有串聯(lián)2個四環(huán)素調(diào)控子 結(jié)合位點(diǎn)(Tet02)基因的PCR產(chǎn)物連接入pcDNA3.1載體CMV啟動子下游,構(gòu)建成pcDNA3.1-Tet02載體,應(yīng)用ABI 3130測序儀利用pcDNA3.1-TetO2載體對TetO2PCR產(chǎn)物進(jìn)行測序分析.再將p-gaI克隆入pcDNA3.1-TetO2載體,構(gòu)建 成受四環(huán)素調(diào)控表達(dá)的β-半乳糖苷酶基因的表達(dá)載體pcDNA3.1-TetO2-β-gal.利用脂質(zhì)體將攜帶四環(huán)素調(diào)控子基因(TR)的 pcDNA6/TR載體轉(zhuǎn)染到肝癌細(xì)胞HepG2中,利用殺稻瘟菌素進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染的穩(wěn)定篩選,采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測TR基因在 HepG2細(xì)胞內(nèi)的表達(dá).將pcDNA3.1-TetO2-β-gal載體轉(zhuǎn)染到穩(wěn)定表達(dá).pcDNA6/TR的HepG2細(xì)胞中,轉(zhuǎn)染3~4 d后,給予強(qiáng)力霉素(4 mg·L-1),利用β半乳糖苷酶原位染色試劑盒染色,檢測β-半乳糖苷酶基因的表達(dá).結(jié)果:構(gòu)建的pcDNA3.1-TetO2載體測序結(jié)果表明,串聯(lián) 2個四環(huán)素調(diào)控子結(jié)合位點(diǎn)(TetO2)基因片段插入到pcDNA3.1載體CMV啟動子基因下游
目的:構(gòu)建調(diào)控β-半乳糖苷酶(β-gal)基因表達(dá)的四環(huán)素基 因表達(dá)調(diào)控載體,驗(yàn)證其在肝癌細(xì)胞內(nèi)調(diào)控β-半乳糖苷酶基因的表達(dá),為進(jìn)一步利用該調(diào)控系統(tǒng)調(diào)控治療基因治療肝癌奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ).方法:根據(jù)2個四環(huán)素調(diào)控 子結(jié)合位點(diǎn)(TetO2)基因與pcDNA3.1載體的基因核苷酸序列,設(shè)計(jì)引物,以pcDNA3.1載體為模板進(jìn)行PCR.將具有串聯(lián)2個四環(huán)素調(diào)控子 結(jié)合位點(diǎn)(Tet02)基因的PCR產(chǎn)物連接入pcDNA3.1載體CMV啟動子下游,構(gòu)建成pcDNA3.1-Tet02載體,應(yīng)用ABI 3130測序儀利用pcDNA3.1-TetO2載體對TetO2PCR產(chǎn)物進(jìn)行測序分析.再將p-gaI克隆入pcDNA3.1-TetO2載體,構(gòu)建 成受四環(huán)素調(diào)控表達(dá)的β-半乳糖苷酶基因的表達(dá)載體pcDNA3.1-TetO2-β-gal.利用脂質(zhì)體將攜帶四環(huán)素調(diào)控子基因(TR)的 pcDNA6/TR載體轉(zhuǎn)染到肝癌細(xì)胞HepG2中,利用殺稻瘟菌素進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染的穩(wěn)定篩選,采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測TR基因在 HepG2細(xì)胞內(nèi)的表達(dá).將pcDNA3.1-TetO2-β-gal載體轉(zhuǎn)染到穩(wěn)定表達(dá).pcDNA6/TR的HepG2細(xì)胞中,轉(zhuǎn)染3~4 d后,給予強(qiáng)力霉素(4 mg·L-1),利用β半乳糖苷酶原位染色試劑盒染色,檢測β-半乳糖苷酶基因的表達(dá).結(jié)果:構(gòu)建的pcDNA3.1-TetO2載體測序結(jié)果表明,串聯(lián) 2個四環(huán)素調(diào)控子結(jié)合位點(diǎn)(TetO2)基因片段插入到pcDNA3.1載體CMV啟動子基因下游猴β-半乳糖苷酶(β-GAL)elisa試劑盒