2×Taq plus Master Mix 含染料

注：以50μl PCR反應(yīng)體系為例，1ml可40次PCR反應(yīng)，5ml可做200次PCR反應(yīng)，25ml可1000次PCR反應(yīng)，100ml可做4000次PCR反應(yīng)。

產(chǎn)品簡介：

本制品是將PCR反應(yīng)所需的Taq酶、dNTPs、MgCl₂以及反應(yīng)緩沖液預(yù)先配制成2倍濃度的混合物。2×Taq plus Master Mix專為常規(guī)PCR擴增反應(yīng)優(yōu)化，擴增長度可達(dá)8kb，能對4kb及其以下長度的片段進行高效地擴增。使用時只需再加入模板和引物并稀釋到1倍濃度即可進行PCR反應(yīng)，大大地簡化了操作過程，減少了PCR操作過程中的污染。提供普通型/快速上樣型兩種形式供您選擇。經(jīng)測試，染料的加入不影響PCR反應(yīng)，在PCR反應(yīng)完成后可直接電泳，節(jié)省時間。使用本試劑擴增得到的PCR產(chǎn)物3´端有一突出"A"堿基，可直接克隆于T載體中。

產(chǎn)品特點 ：

高效：以λDNA為模板，擴增長度可達(dá)8kb，能高效擴增≤4kb片段。

靈敏：可從0.05ng人基因組DNA模板中擴增出特定基因片段。

穩(wěn)定：反復(fù)凍融幾十次，4℃放置30天，室溫放置一周后，擴增性能不受影響。

快捷：PCR反應(yīng)所必需試劑集于一管，數(shù)分鐘即可完成反應(yīng)體系配制。

便利：PCR反應(yīng)后可直接電泳。

質(zhì)量保證：

經(jīng)檢測無外源核酸酶殘留，qPCR方法檢測無大腸桿菌DNA殘留，能有效擴增人基因組中的單拷貝基因。

使用說明：

1、冰浴中*融化2×Master Mix，混勻后離心快甩將溶液收集到管底。

2、按照下表在0.2ml PCR管中制備反應(yīng)體系：

3、快甩離心將反應(yīng)液收集到管底。

4、PCR儀如果沒有熱蓋加熱的話，補加25μl礦物油。

5、PCR儀上執(zhí)行以下程序：

注： PCR 反應(yīng)條件視模板、引物等的結(jié)構(gòu)條件不同而各異。在實際操作中需根據(jù)模板、目的片段的大小、堿基序列和引物的長短等具體情況，設(shè)定*佳的反應(yīng)條件（溫度、時間等）。

6、電泳檢測：含染料的2×Taq plus Master Mix可以直接上樣。

注意事項：

1、 需要溶解*后使用，防止離子濃度不均勻。

2、 菌液 PCR 時預(yù)變性時間≥5min，更有利于破壁。

3、 應(yīng)根據(jù)實驗?zāi)康倪x擇合適循環(huán)數(shù)，循環(huán)數(shù)過少，會造成擴增量不足；循環(huán)數(shù)過多，擴增量增加，但突變率也會增加，并造成非特異性擴增。

4、 根據(jù)引物 Tm 值設(shè)置合適退火溫度，退火溫度過低，會造成非特異性擴增；過高可能擴增不到。

5、 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

保存條件:

-20℃保存一年有效；4℃穩(wěn)定貯存3個月。經(jīng)常使用時，一旦融化后請4℃貯存，盡量避免反復(fù)凍融。