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果膠裂解酶(pectinate lyases,PL)試劑盒

參考價 640.00-1100.00
具體成交價以合同協(xié)議為準
規(guī)格
100管/48樣1100.00元119 盒可售
50管/24樣640.00元96 盒可售

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優(yōu)利科(上海)生命科學有限公司是一家專業(yè)經(jīng)營生化試劑、實驗室耗材的公司, 包括分子生物學、細胞生物學、免疫學、科研診斷等多個研究及應用領域。系集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售為一體的技術(shù)企業(yè)。公司擁有:分子生物學、醫(yī)學、藥學、化學等方面的多名專業(yè)技術(shù)人員。是數(shù)家國外生命科學類公司在中國的總進口商及總經(jīng)銷商。另一方面也非常重視自主產(chǎn)品研究和開發(fā),推出了一系列具有競爭力的產(chǎn)品和服務。同時國家對于生物行業(yè)的發(fā)展給予了的重視,更多地側(cè)重于科研的投入。

公司客戶遍布大學、研究所、生物技術(shù)公司等科研單位。立足于生命科學領域,全力打造高品質(zhì)生物科技產(chǎn)品鏈和技術(shù)服務鏈,也具備豐富的管理經(jīng)驗,同時我們建立了集技術(shù)支持、售后服務等多方位的服務體系。我們有激情、有理想,更有責任感,是您科研道路上值得信賴的伙伴。

我公司將始終堅持信譽立業(yè)、以人為本、質(zhì)量為先、誠信服務的宗旨,不斷拼搏,開拓進取,與各界朋友攜手共創(chuàng)美好未來。






ELISA試劑盒,PCR試劑盒,細胞,抗體,菌種,生化試劑,標準品,質(zhì)粒,培養(yǎng)基

CAS 詳見說明書 純度 詳見說明書
分子量 詳見說明書 分子式 詳見說明書
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100管/48樣、50管/24樣
貨號 YLK-SH103 應用領域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 科研 測試方法: 微量法、紫外分光光度法

果膠裂解酶(pectinate lyases,PL)試劑盒說明書

                                          微量法100T/48S

 

    意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:

果膠裂解酶(EC4.2.2.10)是果膠酶的重要組成部分,是一種能降解植物細胞壁,導致植物組織軟化甚至死亡的解聚酶,來源比較廣泛,主要來源于微生物,可用于果汁、果酒的澄清,提高水果出汁率,植物病毒的純化,紙漿的漂白和紡織品的生物精煉,在減少環(huán)境污染和降低能源消耗方面具有潛在的應用價值。

 

測定原理:

果膠裂解酶作用于果膠中的α-1,4糖苷鍵,生成在還原端C4C5之間位置具有不飽和鍵的不飽和寡聚半乳糖醛酸,在235nm處有特征吸收峰。

 

自備實驗用品及儀器:

天平、低溫離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、恒溫水浴鍋。

 

試劑組成和配制:

提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體6mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體6mL×1瓶,4℃保存。

試劑三:液體6mL×1瓶,4℃保存。

 

酶液提取:

1.組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。10000g ,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2.細菌、真菌:按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后10000g4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。

3. 培養(yǎng)液:直接測定。

測定操作表:

1、   分光光度計/酶標儀預熱30min,調(diào)節(jié)波長至235nm,蒸餾水調(diào)零。

2、   操作表


對照管

測定管

試劑一(μL


120

試劑二(μL

120


40℃溫育3min

酶液(μL

20

20

混勻,40℃反應30min

試劑三(μL

60

60

混勻于微量石英比色皿/96孔板UV板)測定235nm處吸光值A,△A=A測定管-A對照管。

 

酶活性計算公式:

a.        用微量石英比色皿測定的計算公式如下

1. 組織中PL活性

1)按照蛋白濃度計算

酶活性定義:40℃,pH5.5條件下,每毫克蛋白每分鐘分解果膠產(chǎn)生1nmol不飽和半乳糖醛酸所需的酶量為一個酶活力單位。

PL活性(nmol/min/mg prot= ε×d×V反總÷V×Cpr÷T

= 64.1×A÷Cpr

2)按照樣本質(zhì)量計算

酶活性定義:40℃,pH5.5條件下,每克組織每分鐘分解果膠產(chǎn)生1nmol不飽和半乳糖醛酸所需的酶量為一個酶活力單位。

PL活性(nmol/min/g 鮮重)= ε×d×V反總÷V×W÷V樣總)÷T

= 64.1×A÷W

2. 細菌、真菌PL活性

酶活性定義:40℃,pH5.5條件下,每104個細胞每分鐘分解果膠產(chǎn)生1nmol不飽和半乳糖醛酸所需的酶量為一個酶活力單位。

PL活性(nmol/min/104cell= A ÷ε×d×V反總÷V×細胞數(shù)量÷V樣總)÷T

 = 64.1×細胞數(shù)量

3. 培養(yǎng)液PL活性

酶活性定義:40℃,pH5.5條件下,每毫升培養(yǎng)液每分鐘分解果膠產(chǎn)生1nmol不飽和半乳糖醛酸所需的酶量為一個酶活力單位。

PL活性(nmol/min/mL= ε×d×V反總÷V÷T

= 64.1×A

ε:不飽和半乳糖醛酸摩爾消光系數(shù):5200L/mol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V反總:反應總體積,0.2mLV樣:反應體系中樣本體積,0.02mLV樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W,樣本質(zhì)量,g;T:反應時間,30min

 

b.       96孔板測定的計算公式如下

1. 組織中PL活性

1)按照蛋白濃度計算

酶活性定義:40℃,pH5.5條件下,每毫克蛋白每分鐘分解果膠產(chǎn)生1nmol不飽和半乳糖醛酸所需的酶量為一個酶活力單位。

PL活性(nmol/min/mg prot= ε×d×V反總÷V×Cpr÷T

= 128.2×A÷Cpr

2)按照樣本質(zhì)量計算

酶活性定義:40℃,pH5.5條件下,每克組織每分鐘分解果膠產(chǎn)生1nmol不飽和半乳糖醛酸所需的酶量為一個酶活力單位。

PL活性(nmol/min/g 鮮重)= ε×d×V反總÷V×W÷V樣總)÷T

= 128.2×A÷W

2. 細菌、真菌PL活性

酶活性定義:40℃,pH5.5條件下,每104個細胞每分鐘分解果膠產(chǎn)生1nmol不飽和半乳糖醛酸所需的

 

酶量為一個酶活力單位。

PL活性(nmol/min/104cell=ε×d×V反總÷V×細胞數(shù)量÷V樣總)÷T

    = 128.2×細胞數(shù)量

3. 培養(yǎng)液PL活性

酶活性定義:40℃,pH5.5條件下,每毫升培養(yǎng)液每分鐘分解果膠產(chǎn)生1nmol不飽和半乳糖醛酸所需的酶量為一個酶活力單位。

PL活性(nmol/min//mL= ε×d×V反總÷V÷T

= 128.2×A

ε:不飽和半乳糖醛酸摩爾消光系數(shù):5200L/mol/cm;d:比色皿光徑,0.5cm;V反總:反應總體積,0.2mL;V樣:反應體系中樣本體積,0.02mLV樣總:加入提取液體積,1mLCpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W,樣本質(zhì)量,gT:反應時間,30min

果膠裂解酶(pectinate lyases,PL)試劑盒僅供科研!



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