蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Aspartate Beta Hydroxylase (ASPH)

BAH; CASQ2BP1; HAAH; JCTN; Junctin; Humbug; Junctate; Aspartyl/Asparaginyl Beta-Hydroxylase; Peptide-aspartate beta-dioxygenase

型號(hào)：GOY-01D846

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔

預(yù)測(cè)分子量：26.2kDa

實(shí)際分子量：27kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽：Arg562~Arg753 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：8.6

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱：肉毒堿棕櫚?；D(zhuǎn)移酶1A(CPT1A)重組蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱：Recombinant Carnitine Palmitoyltransferase 1A, Liver (CPT1A)

產(chǎn)品名稱：組織A(CTSA)重組蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱：Recombinant Cathepsin A (CTSA)

產(chǎn)品名稱：激7(KLK7)重組蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱：Recombinant Kallikrein 7 (KLK7)

產(chǎn)品名稱：激8(KLK8)重組蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱：Recombinant Kallikrein 8 (KLK8)

產(chǎn)品名稱：N-乙酰α-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGLU)重組蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱：Recombinant N-Acetyl Alpha-D-Glucosaminidase (NAGLU)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

細(xì)胞核分離基因C蛋白抗體 NUDC

核孔蛋白NUP160抗體 NUP160

磷酸化細(xì)胞核分離基因C蛋白抗體 phospho-NUDC(Ser326)

神經(jīng)特異性轉(zhuǎn)錄因子DPF1抗體 Neuro D

N-乙酰轉(zhuǎn)移酶8抗體 NAT8 + NAT8B

N-乙酰轉(zhuǎn)移酶8B抗體 NAT8B

NOMO蛋白抗體 NOMO1

鈉鉀離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 NKCC1

磷酸化鈉離子/氫離子交換蛋白3抗體 phospho-NHE3(Ser552)

神經(jīng)細(xì)胞穿透素2抗體 NPTX2

鈉離子/氫離子交換蛋白3抗體 hydrogen exchanger 3

腦啡肽酶2抗體 Neprilysin 2

天冬氨酸β羥化酶(ASPH)重組蛋白人兔抗小鼠IgG（免疫血清）5ml支

30ml親和層析柱 (2.3×10)30ml個(gè)

次高分子量蛋白質(zhì)Marker10T支

Phosphotungstic acid hydrate 磷鎢酸25g瓶

Ofloxacin 25g瓶

Astaxanthin 蝦青素472-61-720mg

L-Hydroxyproline L-羥基25g瓶

(-)-Sparteine sulfate pentahydrate 五水合司巴丁155627820mg

PEG 8000 聚乙二醇 80001kg瓶

Dehydroandrographolide succinate 脫水內(nèi)酯琥珀酸半酯6906-38-320mg

Citric acid 檸檬酸100g瓶

Neochlorogenic acid 新綠原酸906-33-220mg

中性紅染色液(0.5% 細(xì)胞或組織切片染色)100ml瓶