蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻?hù)要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱(chēng)：Recombinant Enolase 3 (ENO3)

MSE; Beta Enolase; Enolase 3; 2-phospho-D-glycerate hydro-lyase; Skeletal muscle enolase

型號(hào)：GOY-01D1008

酶與激酶

代謝通路

心腦血管

骨骼代謝

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測(cè)分子量：48.1kDa

實(shí)際分子量：45kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Met3~Lys434 (Accession # P15429) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱(chēng)：p21蛋白激活激酶1(PAK1)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱(chēng)：Recombinant p21 Protein Activated Kinase 1 (PAK1)

產(chǎn)品名稱(chēng)：非ATP酶體26S亞基9(PSMD9)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱(chēng)：Recombinant Proteasome 26S Subunit, Non ATPase 9 (PSMD9)

產(chǎn)品名稱(chēng)：NADH脫氫酶1(ND1)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱(chēng)：Recombinant NADH Dehydrogenase 1 (ND1)

產(chǎn)品名稱(chēng)：磷酸二酯酶5A(PDE5A)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱(chēng)：Recombinant Phosphodiesterase 5A, cGMP Specific (PDE5A)

產(chǎn)品名稱(chēng)：基質(zhì)金屬23A(MMP23A)重組蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱(chēng)：Recombinant Matrix Metalloproteinase 23A (MMP23A)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

磷酸化絲/蛋白激酶Plk1抗體 Phospho-PLK1 (Thr210)

/蛋白激酶Plk1抗體 PLK1

親環(huán)蛋白（親環(huán)素）PPIG抗體 PPIG

磷酸化親環(huán)蛋白（親環(huán)素）PPIG抗體 Phospho-PPIG (Ser376)

磷酸化蛋白激酶AKT底物1抗體 Phospho-PRAS40 (Thr246)

磷酸化內(nèi)分泌腺衍生血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子抗體 Phospho-PRK1(Thr774) + PRK2 (Thr816)

富含的激酶2抗體 PYK2

磷酸化富含的激酶2抗體 phospho-PYK2 (Tyr402)

磷酸化/激酶p90RSK蛋白抗體 Phospho-p90RSK (Ser380)

磷酸化/激酶p90RSK蛋白抗體 Phospho-p90RSK (Thr359 + Ser363)

磷酸化富含的激酶2抗體 phospho-PYK2 (Tyr881)

磷酸化/激酶p90RSK蛋白抗體 Phospho-p90RSK (Thr573)

烯醇化酶(ENO3)重組蛋白大鼠人子宮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

號(hào)基礎(chǔ)/號(hào)/NO.4 Agar Base霍亂弧菌選擇性分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

NCI-H295R(人腎上腺皮質(zhì)腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

生長(zhǎng)激素誘導(dǎo)跨膜蛋白(GHITM)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Growth Hormone Inducible Transmembrane Protein (GHITM)

腦—心浸萃培養(yǎng)基 規(guī)格： 100g 用途： 廣泛用于霉菌、酵母、細(xì)菌的培養(yǎng)，括營(yíng)養(yǎng)要求較高的微生物的培養(yǎng)，特別用于礦泉水和城市供水中...

人胰腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

煌綠黃胺/Brilliant Green Agar W/Sulfadiazine沙門(mén)氏菌分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

絲蛋白結(jié)合LIM蛋白1(FBLIM1)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Filamin Binding LIM Protein 1 (FBLIM1)

布氏肉湯 規(guī)格： 250g 用途： 用于空腸彎菌培養(yǎng)及運(yùn)動(dòng)性觀察。(GB、ISO)

人食管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

無(wú)菌雞血清/Sterile Defidrinated Chicken BloodBR100/400毫升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

NCI-H2087(人非小細(xì)胞肺腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

神經(jīng)激肽B(NKB)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Neurokinin B (NKB)