蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Ubiquitin Carboxyl Terminal Hydrolase L3 (UCHL3)

Ubiquitin Thiolesterase; Ubiquitin thioesterase L3; Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase isozyme L3

型號(hào)：GOY-01D1024

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測(cè)分子量：27.3kDa

實(shí)際分子量：29kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Glu2~Ala230 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：5.1

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱：腺苷酸環(huán)化酶7(ADCY7)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant Adenylate Cyclase 7 (ADCY7)

產(chǎn)品名稱：精氨酰氨基肽酶(RNPEP)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Aminopeptidase B (RNPEP)

產(chǎn)品名稱：周期素依賴性激酶9(CDK9)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Cyclin Dependent Kinase 9 (CDK9)

產(chǎn)品名稱：犬尿-3-單加氧酶(KMO)重組蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱：Recombinant Kynurenine-3-Monooxygenase (KMO)

產(chǎn)品名稱：布魯東氏激酶(Btk)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant Bruton'S Tyrosine Kinase (Btk)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Rho家族GTP酶2抗體 RND2/Rho7

Rap核苷酸交換因子(GEF)5抗體 RAPGEF5/Repac

受體輔助蛋白1抗體 REEP1

環(huán)指蛋白135抗體 RNF135

環(huán)指蛋白146抗體 RNF146

RAS相關(guān)蛋白R(shí)ab5B抗體 Rab5b

胞膜間內(nèi)質(zhì)網(wǎng)調(diào)節(jié)蛋白1抗體 RINT1

減數(shù)分裂同源蛋白1抗體 RMND1

環(huán)指蛋白74抗體（重組激活基因1） RNF74

重組激活基因2蛋白抗體 RAG2

RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體 RASSF7

受體表達(dá)蛋白5/息肉相關(guān)蛋白抗體 REEP5

泛素羧基端酯酶L3(UCHL3)重組蛋白人anti-GFP Tag Rabbit Polyclonal antibody100ul瓶

(直徑)13mm有機(jī)濾器0.45um個(gè)

Eosin Y 伊紅Y (醇溶)10g瓶

Chelex 100 sodiumA 螯合樹脂10g瓶

Schisandrin C 五味子丙素61301-33-520mg

Coptisine 黃連堿3486-66-620mg

Ac-LDL 乙酰化低密度脂蛋白2mg瓶

Arachidonic acid 花生四烯酸506-32-120mg

兔抗馬IgG1mg支

臺(tái)盼藍(lán)染色液(0.4%)50ml瓶

Maleicacid 馬來酸100g瓶

Petunidin Chloride 化矮牽牛素1429-30-71mg

Van Gieson 染色液（VG染色液）500ml瓶