蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Cyclin Dependent Kinase 2 (CDK2)

CDKN2; p33(CDK2); Cell division protein kinase 2; p33 protein kinase

型號：GOY-01D1095

酶與激酶

代謝通路

發(fā)育科學(xué)

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測分子量：14.9kDa

實(shí)際分子量：15kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Ser94~Leu212 (Accession # Q63699) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱：S轉(zhuǎn)移酶μ4(GSTm4)重組蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱：Recombinant Glutathione S Transferase Mu 4 (GSTm4)

產(chǎn)品名稱：蛋白O-甘露糖基轉(zhuǎn)移酶1(POMT1)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Protein O-Mannosyltransferase 1 (POMT1)

產(chǎn)品名稱：CD38分子(CD38)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Cluster Of Differentiation 38 (CD38)

產(chǎn)品名稱：抗酶抑制因子1(AZIN1)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Antizyme Inhibitor 1 (AZIN1)

產(chǎn)品名稱：天冬酰胺氨基葡萄糖酶(AGA)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Aspartylglucosaminidase (AGA)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

環(huán)指蛋白187抗體 RNF187

環(huán)指蛋白215抗體 RNF215

磷酸化指狀蛋白RET抗體 Phospho-Ret (Tyr1062)

骨保護(hù)蛋白配體抗體(破骨細(xì)胞分化因子) RANKL

磷酸化成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤抑癌蛋白抗體 phospho-Rb (Ser780)

G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2抗體 RGS2

核受體RXRα抗體 Retinoid X receptor

Rho相關(guān)蛋白激酶1抗體 ROCK1

RRAD抗體 RRAD

Runx3抗體 Runx3

環(huán)指蛋白156抗體 RNF156

Rad51抗體 Rad51

周期素依賴性激酶2(CDK2)重組蛋白大鼠封閉用馬血清(原液)10ml瓶

Hoechst 33342染色液(即用型)50ml瓶

多用離心管架0.2ml-1.5ml-15ml-50ml32-32-12-4個(gè)

雞胚成纖維細(xì)胞英文名稱：DCE

氧化發(fā)酵試驗(yàn)培養(yǎng)基/OF培養(yǎng)基/Hugh-Leifson培養(yǎng)基/HLGB細(xì)菌的氧化發(fā)酵試驗(yàn)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

白紋伊蚊細(xì)胞英文名稱：C6/36

Caov-3(人突狀卵巢腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

細(xì)胞過濾篩(不銹鋼)400目個(gè)

透析袋MD25(8000-14000)D5M卷

Alizarin Fluorine Blue 茜素絡(luò)合指示劑1g瓶

Juxtanodin蛋白(JN)重組蛋白英文名稱：Recombinant Juxtanodin (JN)

蛋白激酶R(PKR)重組蛋白英文名稱：Recombinant Protein Kinase R (PKR)

小鼠子宮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL