產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Carbonic Anhydrase VA (CA5A)

CA-VA; CAVA; CAV; CA5; Carbonate dehydratase 5A, mitochondrial

型號(hào)：GOY-01D1116

酶與激酶

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測分子量：20.9kDa

實(shí)際分子量：20kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Arg7~Lys179 (Accession # P23589) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱：脲酰丙酸酶β(UPB1)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Beta-ureidopropionase (UPB1)

產(chǎn)品名稱：S轉(zhuǎn)移酶α3(GSTa3)重組蛋白  物種：Chicken (Gallus，雞)  英文名稱：Recombinant Glutathione S Transferase Alpha 3 (GSTa3)

產(chǎn)品名稱：磷酸甘油酸變位酶2(PGAM2)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant Phosphoglycerate Mutase 2, Muscle (PGAM2)

產(chǎn)品名稱：丙二酰脫羧酶(MLYCD)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Malonyl Coenzyme A Decarboxylase (MLYCD)

產(chǎn)品名稱：鈣激活核苷酸酶1(CANT1)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant Calcium Activated Nucleotidase 1 (CANT1)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

磷酸化體PSMβ7抗體 phospho-Proteasome 20S beta 7(Ser214)

磷酸化急性髓細(xì)胞白血病1蛋白抗體 phospho-RUNX1 (Ser266)

根蛋白抗體 Radixin

視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤樣蛋白2抗體 Rb2 p130

維甲酸受體G抗體 RXR gamma

Rho GTP酶激活蛋白1/血管畸形骨肥大綜合征相關(guān)蛋白抗體 RASA1

磷酸化Rho GTP酶激活蛋白1/血管畸形骨肥大綜合征相關(guān)蛋白抗體 phospho-RASA1 (Tyr460)

環(huán)指蛋白87 RNF87

細(xì)胞衰老抑制基因蛋白抗體 RSL1D1

中間絲相關(guān)蛋白抗體 Repetin

磷酸化RhoA蛋白抗體 Phospho-RhoA(Ser188)

環(huán)指蛋白86 RNF86

碳酸酐酶ⅤA(CA5A)重組蛋白小鼠octyl -Sepharose CL-4B 辛基-糖凝膠 CL-4B25mL瓶

Stevenleaf 絞股藍(lán)皂苷（混合物）72063-39-920mg

Amylose 直鏈淀粉250mg瓶

Isopimpinellin 異茴芹內(nèi)酯482-27-920mg

Penicillin G Sodium salt 青G鈉鹽1g瓶

羊抗小鼠IgG（免疫血清）0.5ml支

超濾離心管 15ml-10KD15ml個(gè)

Aprotinin 抑制劑()5mg瓶

Cisplatin 100mg瓶

Lysozyme 1g瓶

Xylotetraose 木四糖22416-58-610mg

Potato Dextrose Agar 馬鈴薯葡萄糖(PDA)250g瓶

Penicillin G sodium salt 青G鈉鹽69-57-8100mg