豬脂肪間充質(zhì)干原代細胞

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

豬脂肪間充質(zhì)干細胞分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構成，聚集成團的脂肪細胞由薄層疏松結締組織分隔成小葉；貯存的脂肪，在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸，經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動及炎癥反應，參與多種重要病理生理過程；脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪組織中也存在一些干細胞群，具有自我更新能力和多向分化潛能，被稱為脂肪組織來源的間充質(zhì)干細胞，簡稱脂肪間充質(zhì)干細胞。與骨髓間充質(zhì)干細胞相比，在來源、細胞群特點以及分化潛能等多方面極為相似。但是，脂肪間充質(zhì)干細胞更易獲得足夠數(shù)量的細胞，且獲取過程中對機體損傷更小，是更為理想的自體干細胞源。脂肪組織分離得到脂肪間充質(zhì)干細胞以梭形為主要形態(tài)，BrdU可標記其細胞核。

方法簡介：

公司實驗室分離的豬脂肪間充質(zhì)干細胞采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的豬脂肪間充質(zhì)干細胞經(jīng)CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

大鼠淋巴纖維細胞(RLF)(5×105)  人神經(jīng)細胞HN  CM-H118人腦靜脈血管平滑肌細胞鼬肺上皮細胞;MV-1-Lu  Lewis   小鼠肺癌細胞  人羊膜上皮細胞 Human 人原代輸卵管平滑肌細胞 小鼠原代皮下微血管內(nèi)皮細胞

糖原0酸化酶M(PYGM)重組蛋白 Recombinant Glycogen Phosphorylase, Muscle (PYGM)

IL18R1 Protein Human 重組人 IL18R1 / CD218a 蛋白 (His & Fc 標簽)

LEP重組人 Leptin 蛋白 Protein

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Common magpie/Hong Kong/2256/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

AOC1重組人 AOC1 / Diamine oxidase 蛋白 Protein

大鼠多藥耐藥蛋白1(ABCB1)試劑盒 ，英文名： ABCB1 ELISA Kit

Porcine glucose anspoer 2 (GL2) ELISA Kit 豬葡萄糖轉運蛋白2(GL2)試劑盒

動物源性成分(18S)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforLZM(RabbitLysozyme)ELISAKit兔

體液總膽汁酸酶循環(huán)比色法定量試劑盒20次

ELISAKitPF-4/CXCL4雞血小板因子4

小鼠轉化生長因子-β2(mouse TGF-β2)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠可溶性粒細胞靶受體(mouse sEM-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠端粒酶(mouse Telomerase)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠Toll樣受體-2(mouse TLR-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

豬脂肪間充質(zhì)干原代細胞小鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human soluble tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand (sAIL) ELISA Kit 人可溶性壞死因子相關凋亡誘導配體(sAIL)試劑盒

Human17-ketosteroids,17-KSELISAKit 人17-酮類固醇(17-KS)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD3(Human1,25-dihydroxyvitaminD3)ELISAKit人1,25二羥基3

飲料糖精(saccharin)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次

Mousekeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISAKit小鼠角化細胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)試劑盒規(guī)格：96T/48T

GFRA1重組狗 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 Protein

NR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C 0.5mgNR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C) 谷受體2C(多肽)

CA3重組人 Carbonic Anhydrase III / CA3 蛋白 Protein

CCL27 Protein Human 重組人 CCL27 / CTACK 蛋白

GLIPR1 Protein Mouse 重組小鼠 GLIPR1 / RTVP1 蛋白