蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Diacylglycerol Kinase Eta (DGKh)

Diglyceride kinase eta

型號(hào)：GOY-01D2665

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞膜, 細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量：18.6kDa

實(shí)際分子量：16kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Asp317~Thr451 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：6.8

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

Recombinant Glucose-6-Phosphatase, Catalytic (G6PC)產(chǎn)品名稱：葡萄糖-6-磷酸酶催化亞基(G6PC)重組蛋白物種：Human，人G6PT; GSD1a; Glycogen Storage Disease Type I,von Gierke Disease; Glucose-6-phosphatase alpha

Recombinant Pyridoxal Kinase (PDXK)產(chǎn)品名稱：吡哆醛激酶(PDXK)重組蛋白物種：Rat，大鼠PKH; PNK; C21orf124; C21orf97; PRED79; Pyridoxine Kinase; Vitamin B6 Kinase

Recombinant Xylosyltransferase II (XYLT2)產(chǎn)品名稱：木糖基轉(zhuǎn)移酶Ⅱ(XYLT2)重組蛋白物種：Human，人XT-II; XT2; xylT-II; PXYLT2; Protein Xylosyltransferase 2; Peptide O-xylosyltransferase 1

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

三葉草根瘤菌 Rhizobium trifolii

4-磺酰杯[4]芳烴水合物(>94.0%(T)) 質(zhì)量規(guī)格：>94.0%(T) 4-Sulfocalix[4]arene Hydrate

 WM35, 人黑色素瘤細(xì)胞

4-磺酰杯[6]芳烴水和物(>95.0%(HPLC)) 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC) 4-Sulfocalix[6]arene Hydrate

 美味側(cè)耳 Pleurotus sapidus

4-叔丁基杯[4]芳烴-O,O',O'',O'''-四乙四乙酯(>96.0%(HPLC)) 質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(HPLC) Tetraethyl 4-tert-Butylcalix[4]arene-O,O',O'',O'''-tetraacetate

 運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌運(yùn)動(dòng)亞種 Zymomonas mobilis subsp. mobilis

4-磺杯[8]芳烴水合物(>98.0%(HPLC)(T)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T) 4-Sulfocalix[8]arene Hydrate

 鼠IgG-鼠IgG5 x 1ml

4-叔丁基硫雜杯[4]芳烴(>98.0%(HPLC)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC) 4-tert-Butylthiacalix[4]arene

 NRK-52E，大鼠腎細(xì)胞

4-叔丁基-1-(乙氧羰基基)硫雜杯[4]芳烴(>94.0%(HPLC)) 質(zhì)量規(guī)格：>94.0%(HPLC) 4-tert-Butyl-1-(ethoxycarbonylmethoxy)thiacalix[4]arene

 異常畢赤酵母 Pichia anomala

4-叔丁基磺酰杯[4]芳烴(>98.0%(HPLC)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC) 4-tert-Butylsulfonylcalix[4]arene

 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

4-磺基硫雜[4]芳烴鈉鹽(>98.0%(HPLC)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC) 4-Sulfothiacalix[4]arene Sodium Salt

二酰甘油激酶η(DGKh)重組蛋白人牛胱天蛋白3(Casp-3)免疫試劑盒

DTA培養(yǎng)基 Dextrose Tryptone Agar Medium 250g

豬腎素(Renin)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

1000mL TBS-Tween-20 (TTBS),20X   TBS-Tween-20 (TTBS),20X   常溫保存

250mL 麗春紅S染膜液 Ponceau S BlotStain 避光保存

人白介素29(IL-29)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

營(yíng)養(yǎng)肉汁 Nutrient Broth 250g

人清道夫受體類B成員1(SCARB1)免疫試劑盒

大鼠化糖原合成激3(pGSK-3)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

大鼠基質(zhì)金屬蛋白7(MMP-7)免疫試劑盒

cary-blair（液體）（含拭子）  3ml*20