乙醇酸氧化酶測(cè)試盒

分光光度法 50 管/48 樣 

注意：正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。 

測(cè)定意義 

乙醇酸氧化酶（EC1.1.3.15）是植物光呼吸代謝中的關(guān)鍵酶，也是光下合成草酸的關(guān)鍵酶，它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸，對(duì)研究光呼吸代謝過程及其調(diào)控具有重要意義。 

測(cè)定原理 

乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸，乙醛酸和鹽酸苯肼反應(yīng)生成乙醛酸苯腙，在 324nm 有特征吸收峰。 

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 

天平、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、1mL 石英比色皿。 

試劑組成和配制 

提取液：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。 

試劑一：液體 35mL×1 瓶，4℃保存。 

試劑二：粉劑×1 瓶，4℃避光保存，臨用前加 10mL 雙蒸水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。 

試劑三：液體 5mL×1 瓶，4℃保存。酶液提取按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。12000g， 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。

酶活性計(jì)算公式 

1．按照蛋白濃度計(jì)算

酶活性定義：

每毫克蛋白每分鐘氧化 1 nmol 乙醇酸所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。GOX 活性（nmol/min /mg prot）= dA×?ε×V 反總÷（V 樣×Cpr）÷T= 392×△A÷Cpr乙醇酸氧化酶測(cè)試盒