RPMI-1640 培養(yǎng)基 是細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域廣泛應(yīng)用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基之一,由 George E. Moore 及其同事于 1967 年 在美國(guó)有名的癌癥研究機(jī)構(gòu) Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 開(kāi)發(fā)并命名。其名稱中: RPMI:明確標(biāo)識(shí)其誕生地——羅斯威爾公園紀(jì)念研究所。 1640:代表該研究所內(nèi)部開(kāi)發(fā)的培養(yǎng)基序列代號(hào)。 該培養(yǎng)基的設(shè)計(jì)源于對(duì) McCoy's 5A 培養(yǎng)基 的改良與優(yōu)化。其核心緩沖體系采用 碳酸氫鹽 (NaHCO?) 緩沖系統(tǒng),這意味著其 pH 值的穩(wěn)定依賴于培養(yǎng)環(huán)境中適當(dāng)濃度的 二氧化碳 (CO?),通常在 5% CO? 的培養(yǎng)箱條件下使用,以實(shí)現(xiàn)生理 pH 范圍 (約 7.2 - 7.4)。 RPMI-1640 (含酚紅型) 的配方包含以下關(guān)鍵組分: 必需氨基酸與部分非必需氨基酸:為蛋白質(zhì)合成提供基本構(gòu)件。 無(wú)機(jī)鹽與微量元素:提供鈉、鉀、鈣、鎂、磷等宏量元素以及鐵、鋅等微量元素,維持細(xì)胞滲透壓平衡、酶活性及信號(hào)傳導(dǎo)。 能量來(lái)源:主要為葡萄糖。 pH 指示劑:酚紅,用于肉眼或儀器監(jiān)測(cè)培養(yǎng)基的 pH 變化(酸性時(shí)呈黃色,堿性時(shí)呈紫紅色)。 關(guān)鍵特性與使用要求: 不含蛋白質(zhì)、脂類或生長(zhǎng)因子:RPMI-1640 被明確歸類為 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 (Basal Medium)。它未包含細(xì)胞生長(zhǎng)增殖所必需的蛋白質(zhì)(如白蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白)、脂質(zhì)(如脂肪酸)以及關(guān)鍵的肽類生長(zhǎng)因子(如胰島素、EGF、FGF 等)。 需補(bǔ)充添加物:鑒于上述缺失的關(guān)鍵成分,RPMI-1640 必須 在使用前補(bǔ)充: 血清:胎牛血清 (FBS) 或新生牛血清 (NBCS),通常添加比例為 5% - 20% (v/v),血清提供必需的蛋白質(zhì)、生長(zhǎng)因子、激素、脂質(zhì)和微量元素。 或 無(wú)血清添加物/補(bǔ)充劑 (Serum-Free Supplements):專為特定細(xì)胞類型設(shè)計(jì)的化學(xué)成分明確或部分明確的混合物,用于替代血清功能。 廣泛應(yīng)用性:由于其良好的營(yíng)養(yǎng)平衡和緩沖能力,RPMI-1640 特別適合于多種懸浮細(xì)胞(如人外周血淋巴細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞、某些白血病細(xì)胞系)和部分貼壁細(xì)胞(如某些癌細(xì)胞系)的培養(yǎng),是免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、血液學(xué)研究中的主流培養(yǎng)基之一。 |