諾博萊德  伊文斯藍(lán)染色液(0.5%)；Evan’s Blue Stain Solution，0.5%

伊文斯藍(lán)染色液(0.5%) 細(xì)胞周期及凋亡染色

產(chǎn)品貨號(hào)：G9698

產(chǎn)品名稱：伊文斯藍(lán)染色液(0.5%)；Evan’s Blue Stain Solution，0.5%

產(chǎn)品規(guī)格：100mL / 500mL

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

中文名稱：伊文斯藍(lán)染色液(0.5%)

英文名稱：Evan’s Blue Stain Solution，0.5%

別名：伊文思蘭;偶氮藍(lán);依文氏蘭;依文思藍(lán);依文斯蘭;埃文斯藍(lán);6,6'-[[3,3'-二甲基(1,1'-二苯基)-4,4'-二基]雙(偶氮基)]雙(4-氨基-5-羥基-1,3-萘二磺酸)四鈉鹽

CAS：314-13-6

分子式：C₃₄H₂₄N₆Na₄O₁₄S₄

分子量：960.81

規(guī)格：100mL ; 500mL

儲(chǔ)存條件

RT，避光保存，有效期1年。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder G9698 伊文斯藍(lán)染色液(0.5%)；Evan’s Blue Stain Solution，0.5%產(chǎn)品介紹

伊文斯蘭(Evans Blue)又稱偶氮藍(lán)。伊文斯蘭與臺(tái)盼藍(lán)都是細(xì)胞活性染料，常用于檢測(cè)細(xì)胞膜的完整性和細(xì)胞是否存活?；罴?xì)胞因有外排功能而無法被伊文斯蘭染成藍(lán)色，而死細(xì)胞會(huì)被染成淡藍(lán)色。因此可以通過此方法在顯微鏡下區(qū)分死細(xì)胞與活細(xì)胞，但無法區(qū)分死亡與壞死。

操作步驟：(僅供參考)

(一) 血腦屏障通透性

1. 取處理后的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(以小鼠為例)，經(jīng)尾靜脈或股靜脈按照2-3ml/kg的比例注射伊文斯藍(lán)染色液(0.5%)， 小鼠眼睛、尾巴應(yīng)在注射后 10s 內(nèi)出現(xiàn)藍(lán)色，1h 后耳朵爪子應(yīng)變藍(lán)。計(jì)時(shí) 1h 后處死小鼠，取目的腦 組織，如批量實(shí)驗(yàn)需分別計(jì)時(shí)保證每只小鼠都暴露 1h。

2. 腦組織置于 1.5mL 離心管中，加入 1mL 用 1×PBS 稀釋的 50%三氯yi酸， 迅速用組織勻漿器將腦組 織制成勻漿, 10000×g 離心 20min。

3. 取上清用無水乙醇四倍稀釋。

4. 取上述溶液，用分光光度計(jì)測(cè) 620nm 處吸光值(OD 值)。同時(shí)測(cè)定已知不同梯度的標(biāo)準(zhǔn)伊文斯藍(lán)的 OD 值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出待測(cè)樣品的伊文斯藍(lán)含量。

(二) 活細(xì)胞染色

1. 取 100μL 重懸細(xì)胞到常規(guī)離心管內(nèi)，加入 100μL 0.5%伊文斯藍(lán)染色液輕輕混勻染色(染色時(shí)間可適當(dāng) 延長(zhǎng)，但不宜超過 10min)。

2. 吸取少量經(jīng)過染色后的細(xì)胞，用血細(xì)胞ji數(shù)板計(jì)數(shù)。通常如果要比較精確地進(jìn)行定量，每個(gè)細(xì)胞樣品 至少數(shù) 500 個(gè)細(xì)胞，數(shù)出藍(lán)色細(xì)胞和細(xì)胞總數(shù)。細(xì)胞存活率計(jì)算公式如下：

3. 細(xì)胞存活率＝(細(xì)胞總數(shù)－藍(lán)色細(xì)胞數(shù))/細(xì)胞總數(shù)×100%

注意事項(xiàng)：

1. 伊文斯藍(lán)染色液(0.5%)對(duì)人體有輕微毒性，請(qǐng)小心防護(hù)。

2. 細(xì)胞染色時(shí)，注意凋亡小體偶爾也有拒染現(xiàn)象。

3. 血腦屏障通透性實(shí)驗(yàn)中，染色試劑注射量應(yīng)根據(jù)不同動(dòng)物以及動(dòng)物的重量調(diào)整。

4. 最好采用低溫冷凍離心機(jī)進(jìn)行離心。

5. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

伊文斯藍(lán)染色液(0.5%) 細(xì)胞周期及凋亡染色

產(chǎn)品訂購信息：

NobleRyder G9698 伊文斯藍(lán)染色液(0.5%)；Evan’s Blue Stain Solution，0.5% 100mL / 500mL