BI6020 β-葡萄糖苷酶試劑盒 糖代謝系列-常備現(xiàn)貨
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號 BI6020
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時間 2025/7/17 12:18:07
- 訪問次數(shù) 125
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/24S |
|---|---|---|---|
| 貨號 | BI6020 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
β-葡萄糖苷酶（β-Glucosidase, β-GC）試劑盒說明書
分光光度法 50 管/24 樣
正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定測定意義：
β-GC（EC 3.2.1.21）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，催化β-糖苷鍵水解，具有多方面生理作用：在纖維素的糖化作用中，β-GC 負責進一步水解纖維素二糖和纖維素寡糖生成葡萄糖；β-GC 水解萜烯類香氣前驅(qū)體，使糖苷鍵合態(tài)變成游離態(tài)。從而產(chǎn)生香味；β-GC 能夠水解植物體內(nèi)野黑櫻苷，釋放HCN，從而防止昆蟲取食。
測定原理：
β-GC 分解對-硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷生成對-硝基ben酚，后者在 400nm 有最大吸收峰，通過測定吸光值升高速率來計算β-GC 活性。
β-葡萄糖苷酶試劑盒 糖代謝系列-常備現(xiàn)貨
組成：
產(chǎn)品名稱 | BI6020-50T/24S | Storage |
提取液：液體 | 50ml | 4℃ |
試劑一：粉劑 | 2 瓶 | 4℃ |
試劑二：液體 | 25ml | -20℃ |
試劑三：液體 | 50ml | 4℃ |
說明書 | 一份 | |
試劑一：粉劑×2 瓶，-20℃保存；臨用前每瓶加入 10ml 蒸餾水，充分溶解備用；用不完的試劑仍-20℃保存。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1ml 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
粗酶液提取：
1、細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細菌或細胞數(shù)量（104 個）：提取液體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細菌或細胞加入 1ml 提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）；15000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
2、組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1ml 提取液），進行冰浴勻漿。15000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
3、培養(yǎng)液、血清（漿）等液體樣本：直接檢測。
測定步驟：
1、分光光度計預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 400nm，蒸餾水調(diào)零。
2、加樣表
試劑名稱（μl） | 測定管 | 對照管 |
試劑一 | 400 | |
蒸餾水 | 400 | |
試劑二 | 500 | 500 |
樣本 | 100 | 100 |
迅速混勻，放入 37℃準確水浴 30min 后，立即放入 95℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失），流水冷卻后充分混勻（以保證濃度不變），8000g，4℃，離心 5min，取上清液
上清液 | 500 | 500 |
試劑三 | 1000 | 1000 |
充分混勻，室溫靜置 2min 后， 400nm 處測定吸光值A，計算ΔA=A 測定管-A 對照管。每個測定管需設(shè)一個對照管。
β-GC 活力計算：
標準條件下測定的回歸方程為y =0.00543x -0.0027；x 為標準品濃度（nmol/ml），y 為吸光值。
（1） 按液體體積計算：
單位的定義：每ml 樣本每分鐘產(chǎn)生 1nmol 對-硝基ben酚定義為一個酶活性單位。
β-GC 活性(nmol/min/ml)=[(ΔA+0.0027) ÷0.00543×V 反總]÷V 樣÷T
=61.39×(ΔA+0.0027)
（2） 按樣本蛋白濃度計算：
單位的定義：每mg 組織蛋白每分鐘產(chǎn)生 1nmol 對-硝基ben酚定義為一個酶活力單位。
β-GC 活力(nmol/min/mg prot)=[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V 反總]÷(V 樣×Cpr)÷T
=61.39×(ΔA+0.0027) ÷Cpr
需要另外測定，建議使用本公司BCA 蛋白質(zhì)含量測定試劑盒。
（3） 按樣本鮮重計算：
單位的定義：每g 組織每分鐘產(chǎn)生 1nmol 對-硝基ben酚定義為一個酶活力單位。
β-GC 活力(nmol/min /g 鮮重)＝[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V 反總]÷(W×V 樣÷V 樣總)÷T
=61.39×(ΔA+0.0027) ÷W
（4） 按細菌或細胞密度計算：
單位的定義：每 1 萬個細菌或細胞每分鐘產(chǎn)生 1nmol 對-硝基ben酚定義為一個酶活力單位。
β-GC 活力(nmol/min /104 cell)=[(ΔA+0.0027) ÷0.00543×V 反總]÷(500×V 樣÷V 樣總)÷T
=0.123×(ΔA +0.0027)
V 反總：反應(yīng)體系總體積，1ml；V 樣：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.1ml；V 樣總：加入提取液體積，1ml；
Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本質(zhì)量，g； 500：細胞或細菌總數(shù)，500 萬；T：反應(yīng)時間，30min。
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