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改良Gram-Weigert(苯胺結(jié)晶紫法)

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革蘭氏染色法是丹麥醫(yī)生Christain Gram1884年所發(fā)明,是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法,亦是一種復(fù)染法,通過此法染色可將細(xì)菌鑒別為革蘭陽性菌(G+)和革蘭陰性菌(G-)兩大類。細(xì)菌的不同顯色反應(yīng)是由于細(xì)胞壁對乙醇的通透性和抗脫色能力的差異,主要是肽聚糖層厚度和結(jié)構(gòu)決定的,在同樣染色環(huán)境中利用細(xì)菌不同的等電點(diǎn)(Gram陽性細(xì)菌等電點(diǎn)為pH2.0~3.0,Gram陰性細(xì)菌等電點(diǎn)為pH4.0~5.0),陽性細(xì)菌帶的負(fù)電荷比陰性細(xì)菌帶的負(fù)電荷多,與帶正電荷的堿性染料如結(jié)晶紫結(jié)合較牢,再加入媒染劑(碘)進(jìn)入菌體后,與染料結(jié)合形成不溶于水的結(jié)晶紫-碘-蛋白復(fù)合物,并與陽性菌菌體內(nèi)的核糖核酸鎂鹽結(jié)合,使已著色的細(xì)菌不易脫色;而分化劑(苯胺、丙酮等)不易透過陽性菌的細(xì)胞壁,故陽性菌不易退色;但分化劑容易進(jìn)入陰性菌菌體內(nèi),溶解染料和碘復(fù)合物,使陰性菌脫色。

    Leagene 改良Gram-Weigert(苯胺結(jié)晶紫法)是在經(jīng)典的革蘭染色配方進(jìn)行改進(jìn),使用蘇木素和Weigert碘液加強(qiáng)染色,該法也是在草酸銨結(jié)晶紫法演化過來的;臨床標(biāo)本直接涂片,背景干凈,胞內(nèi)吞噬體清晰易辨認(rèn),細(xì)菌染色特征典型,可以區(qū)分Gram陽性細(xì)菌和陰性細(xì)菌,尤其適用于鑒別細(xì)菌和非細(xì)菌的藍(lán)色微顆粒狀物質(zhì)(如鈣鹽)。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。




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