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兔子宮內膜間質原代細胞

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X8120 應用領域 化工,生物產業(yè)
主要用途 僅供科研實驗

本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細胞屬性:

兔子宮內膜間質原代細胞

方法簡介

實驗室分離的兔子宮內膜間質采用膠原酶消化結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

實驗室分離的兔子宮內膜間質經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產品名稱

兔子宮內膜間質原代細胞

組織來源

子宮

英文名稱

Rabbit Endometrial   Mesenchymal Cells

貨號

YS-01X8120

產品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實驗

 

細胞簡介:

兔子宮內膜間質細胞分離自子宮組織;子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結構維持,這些結構受損或松弛時,可以引起子宮脫垂。子宮內膜即黏膜,由上皮(屬單層柱狀上皮,有分泌細胞和纖毛細胞二種)和固有膜(由結締組織構成,其內有大量的星形細胞,稱為基質細胞)組成,子宮內膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層,功能層較厚,約占內膜厚度的4/5;基底層較薄較致密,約占1/5,功能層可剝脫,而基底層不可剝脫。子宮內膜構成雌性哺乳動物子宮壁的內層,位于子宮腔面,在動物生殖生理活動中占有重要地位。子宮和子宮內膜是維持雌性動物生理功能和生育能力的重要器官,子宮內膜的再生修復是子宮的重要生理功能。體外培養(yǎng)的子宮內膜間質細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

兔子宮內膜間質原代細胞

培養(yǎng)信息:

兔子宮內膜間質原代細胞

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細胞形態(tài):成纖維細胞樣

傳代特性:可傳3代左右

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO25%

兔子宮內膜間質細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔子宮內膜間質原代細胞

細胞培養(yǎng)方法:

兔子宮內膜間質原代細胞

1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

操作步驟:

兔子宮內膜間質原代細胞
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。

公司產品:兔子宮內膜間質原代細胞

小鼠骨髓細胞;FDC-P1 大鼠視網膜節(jié)細胞培養(yǎng)基 100mL

骨形態(tài)發(fā)生蛋白8b抗體

Ras樣蛋白家族10A抗體

細胞分裂周期蛋白2抗體

酸協(xié)同轉運蛋白抗體

蛋白激酶Aγ抗體

叢蛋白B2抗體

胚胎干細胞相關轉錄因子1抗體

鋅指蛋白318抗體

肌細胞增強因子2抗體

PATU-8988/FU 人胰腺癌耐藥

C2C12, 小鼠肌原細胞

RSC, 大鼠雪旺細胞 NCYC   234[IPAZSC 148]細胞 COS-7(SV40 轉化的非洲綠猴腎細胞)

人鼻咽癌細胞;CNE-2Z

人卵巢微血管內皮細胞HOMEC

EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY1008

CL-0091HBL-100(人整合SV40基因的上皮細胞)5×106cells/瓶×2

CL-0200RWPE1(人前列腺上皮細胞)5×106cells/瓶×2

非洲綠猴腎細胞;VERO C1008 (E6) 中國倉鼠肺細胞,V79細胞 HCCC-9810(膽管細胞型肝癌細胞)

兔子宮內膜間質原代細胞蛋白激酶Aγ抗體

肝內膽管上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

3T6-Swiss albino細胞,胚胎成纖維細胞   人胰腺癌細胞,CaPan-/Capan-2細胞 CM-M040小鼠肝竇內皮細胞培養(yǎng)基100mL

人臍靜脈內皮細胞;HUV-EC 人胰腺星狀細胞培養(yǎng)基 100mL

豬細胞;ST

成纖維細胞生長添加物(不含動物成分)FGS-acf

死亡效應結構域蛋白2抗體

肥大細胞蛋白酶7抗體

人腎透明細胞癌;Caki-1

抑癌蛋白DKK1抗體

白細胞介素28B抗體

抗細胞凋亡蛋白OLFM44抗體

PATU-8988/FU 人胰腺癌尿耐藥

 






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