菌種名稱：艱難梭菌

英文名稱：Clostridium difficile

培養(yǎng)基 特殊蛋白胨：23.0，可溶性淀粉：1.0，氯化鈉：5.0，瓊脂：10.0，脫纖維羊血：5%(50℃添加)，pH：7.3±0.2（25℃） 

生長條件 37℃；48-72h；厭氧 

存儲(chǔ)條件 -80℃ 

安全等級(jí) 2 

形態(tài) 菌落直徑為0.5-1mm，圓形，邊緣不規(guī)則，不透明，正面灰白色，中間凸起，表面光滑，質(zhì)地濕潤，易挑起，G＋（藍(lán)紫色），桿菌 

模式菌株 no 

操作步驟 ①準(zhǔn)備上述平板2塊；②安瓿管表面消毒后在安全柜中打開，用酒精燈灼燒頂部，后迅速滴上無菌水使之破裂，隨后用鑷子將其敲碎；③吸取0.5mL無菌水（置于厭氧環(huán)境平衡24h）打入凍干管，充分溶解菌粉后，打入2塊平板，200μL/個(gè)，涂布均勻；④將平板置于上述培養(yǎng)條件下培養(yǎng)，菌種長出即可使用。 

注意事項(xiàng)：

1.微生物菌種應(yīng)保存于低溫、清潔和干燥的地方，室溫放置時(shí)間過長會(huì)導(dǎo)致菌種衰退；

2.艱難梭菌操作在無菌條件下進(jìn)行，接種完畢應(yīng)該滅菌再做丟棄處理；

3.斜面菌種和穿刺菌種保存時(shí)間通常為 3-6 個(gè)月，應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時(shí)結(jié)轉(zhuǎn)；凍干粉保存時(shí)間通常是 2-25 年；甘油菌保存時(shí)間為 2-5 年。

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