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EVOM2跨膜細(xì)胞電阻儀

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EVOM2跨膜細(xì)胞電阻儀是二代的用于特異性完成組織培養(yǎng)研究中TEER測(cè)量的電阻儀,與一代的EVOM相比具有操作更簡(jiǎn)單,使用更輕松的特點(diǎn)。EVOM2不僅可以定性地測(cè)量單層貼壁細(xì)胞的健康狀態(tài),而且也能定量地測(cè)量單層細(xì)胞的融合情況。

EVOM2 電路設(shè)計(jì)和STX2電極的結(jié)合,讓其可以監(jiān)測(cè)單層細(xì)胞的融合狀態(tài),當(dāng)與WPI 公司設(shè)計(jì)的單個(gè)小室結(jié)合使用時(shí),它也可以用來(lái)完成更加精確的定量測(cè)量或更低電阻的測(cè)量,如血腦屏障(BBB)內(nèi)皮生長(zhǎng)電阻測(cè)量。

工作原理

EVOM2 跨膜細(xì)胞電阻儀的工作原理是通過(guò)主機(jī)產(chǎn)生一個(gè)10 μA的恒定跨膜電流,同時(shí)以一定的頻率反轉(zhuǎn)電極的極性,這樣電極膜都沒(méi)有電荷累積,通過(guò)STX2 的兩個(gè)電流電極(I1和I2)使10 μA 的電流跨過(guò)細(xì)胞膜,另一對(duì)電極(V1和V2)測(cè)量要求達(dá)到10 μA電流所需要的電壓,并將信息發(fā)送給處理器。處理器根據(jù)歐姆定律將其轉(zhuǎn)化為歐姆,在讀數(shù)表上顯示數(shù)字。因?yàn)殡娏魇枪潭ǖ?0 μA,因此,很容易就轉(zhuǎn)化出測(cè)量結(jié)果。如在膜電阻為1000 Ω時(shí),10 μA電流通過(guò)的電壓應(yīng)該是10mV;在200 Ω膜電阻時(shí),10 μA的電流將產(chǎn)生2 mV的電壓;不論何種情況,在膜或電極上所消耗的能量都非常小。

儀器用途

■ 用于研究血腦屏障內(nèi)皮細(xì)胞的藥物和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn);

■ 用于CaCo-2大腸癌細(xì)胞或其它粘膜或上皮癌細(xì)胞的藥效學(xué)研究;

■ 用于培養(yǎng)的腸道粘膜細(xì)胞的藥物吸收和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)研究;

細(xì)胞電阻儀測(cè)量常見(jiàn)問(wèn)題的解決方案:

1、在每次測(cè)電阻之前是否需要每次都對(duì)電極等進(jìn)行檢測(cè)?

答:每次測(cè)量前對(duì)儀器自檢即可,電極不需要每次都自檢,因?yàn)殡姌O通常出問(wèn)題的概率比較小,除非感覺(jué)測(cè)量結(jié)果異常,并且儀器自檢也正常時(shí),才考慮電極的問(wèn)題。

2、我在測(cè)跨細(xì)胞電阻時(shí),使用的是24孔板transwell小室,測(cè)得時(shí)候外側(cè)電極片會(huì)碰到接觸小室外側(cè),這樣時(shí)候會(huì)影響結(jié)果?

答:外側(cè)電極片用于向溶液中注入電流,只要電極片能接觸到溶液就不會(huì)影響測(cè)量。

無(wú)論內(nèi)側(cè)還是外側(cè)電極片,碰到小室都問(wèn)題不大,只要電極片浸入到溶液中即可,溶液充當(dāng)電極與細(xì)胞之間的導(dǎo)體。

3、在測(cè)電阻時(shí),有時(shí)小室內(nèi)側(cè)培養(yǎng)基液面不足以沒(méi)過(guò)電極片,這時(shí)再往里加培養(yǎng)基,是否會(huì)影響結(jié)果?

答:測(cè)量時(shí)添加的培養(yǎng)液盡量能使電極片浸沒(méi)。如果因某種實(shí)驗(yàn)考慮而無(wú)法做到這一點(diǎn),則應(yīng)當(dāng)確保在測(cè)量空白和細(xì)胞時(shí),添加的溶液體積保持一致(上面及下面),這樣,沒(méi)有細(xì)胞時(shí)的空白電阻才能代表有細(xì)胞時(shí)的空白值。

4、上次我測(cè)空白電阻(未加細(xì)胞之后培養(yǎng)基)為200Ω左右,加入細(xì)胞12小時(shí)后測(cè)量,電阻值反而低了,是什么原因?

答:加細(xì)胞后的電阻不會(huì)比不加細(xì)胞更低,如果低的話也只是誤差范圍內(nèi)的差距,或者是由于電極浸入液面深度不同造成的差距。當(dāng)細(xì)胞沒(méi)有融合而處于分散狀態(tài)時(shí),電阻基本上和空白一個(gè)水平。你可以再次測(cè)量留意一下。

         



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