白喉抗體檢測(cè)試劑盒（測(cè)總抗）

白喉是由白喉棒狀桿菌引起的急性傳染病，也是一種古老的傳染病。20世紀(jì)30年代，白喉類毒素主動(dòng)免疫逐漸開展起來，使白喉的發(fā)病率顯著下降，1978年WTO開始推行擴(kuò)大計(jì)劃免疫，全球白喉發(fā)病率進(jìn)一步下降。目前，有些國(guó)家如美國(guó)已無白喉病例，中國(guó)近幾年也未發(fā)現(xiàn)白喉病例，但在部分國(guó)家如非洲一些國(guó)家以及中國(guó)周邊一些國(guó)家還存在白喉病例及爆發(fā)、流行，仍有國(guó)外輸入以及國(guó)內(nèi)疫情復(fù)燃的可能，了解并加強(qiáng)白喉的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)十分必要。

【試劑準(zhǔn)備】

將所有的試劑和樣本平衡至室溫(20-25°C)，并在開始測(cè)試運(yùn)行前進(jìn)行混合是非常重要的！

洗滌液

用蒸餾水根據(jù)1+19稀釋洗滌濃縮液，例如，10 mL洗滌濃縮液+190mL蒸餾水混合。稀釋的洗滌液在室溫下（20-25℃）可保存5天，如果在濃縮液中出現(xiàn)晶體，則將溶液加熱至37°C，例如在水浴中。稀釋前攪拌均勻。

底物液

試劑為即用型，不需要稀釋。必須儲(chǔ)存在2-8°C，避光。溶液應(yīng)該是無色的，或者可以有一個(gè)輕微的藍(lán)色色調(diào)。如果基質(zhì)變成藍(lán)色，它可能已經(jīng)被污染了，應(yīng)該被扔掉。

【樣本采集和制備】

使用人血清或血漿（檸檬酸、肝素）樣本。如果在樣本采集后5天內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)，樣本應(yīng)保持在2-8°C；否則應(yīng)分裝并深度冷凍保存(-70至-20°C)。如果樣本是冷凍保存的，在檢測(cè)前將解凍的樣本混合。避免反復(fù)凍結(jié)和解凍。不建議對(duì)樣本進(jìn)行熱失活。

樣本稀釋

檢測(cè)前，所有樣本應(yīng)用IgG樣本稀釋緩沖液稀釋1+100。將10µL樣本和1 mL IgG樣本稀釋緩沖液加入試管中，渦旋混勻。

檢測(cè)步驟

1）加100µL標(biāo)準(zhǔn)品或質(zhì)控品和稀釋的樣本至相應(yīng)的微孔中，保留A1為空白對(duì)照。

2）用提供的封板紙封板。

3）37± 1 °C孵育1小時(shí)± 5 分鐘。

4）棄掉微孔中的內(nèi)容物，用稀釋的洗滌液沖洗孔3次(每次每孔300µL)。洗滌和吸入的時(shí)間間隔應(yīng)>5s。在吸收性紙上用力擊打微孔板，以去除殘留的液滴。

5）加100µL酶聯(lián)物至每個(gè)微孔中，除了空白孔。

6）室溫下（20-25℃）避光孵育30分鐘。

7）重復(fù)洗滌步驟。

8）加100µL底物液至每個(gè)微孔中。

9）在黑暗環(huán)境中室溫下孵育15分鐘。

10）加100µL終止液至每個(gè)微孔中。

11）在加入終止液溶液后的30分鐘內(nèi)，用酶標(biāo)儀讀取在450/620nm處的吸光度

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