北京迪科馬科技有限公司（迪馬科技）
2025國(guó)抽新增：焦糖色中4-甲基咪唑的測(cè)定
檢測(cè)樣品：焦糖色
檢測(cè)項(xiàng)目：4-甲基咪唑
方案概述：2025年食品安全監(jiān)督抽檢實(shí)施細(xì)則，增加了食品添加劑焦糖色的監(jiān)督抽檢，4-甲基咪唑做為焦糖色的重要檢驗(yàn)項(xiàng)目，迪馬科技根據(jù)食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) GB 1886.64-2015 食品添加劑 焦糖色，附錄A.5 4-甲基咪唑的測(cè)定，建立了焦糖色中4-甲基咪唑的測(cè)定方法。
焦糖色中4-甲基咪唑的測(cè)定 SPE-GC 法
參考GB 1886.64-2015 《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑 焦糖色》 中 A.5 4-甲基咪唑的測(cè)定
焦糖色素亦稱焦糖，是一種在食品工業(yè)中應(yīng)用范圍十分廣泛的天然著色劑，是食品添加劑的重要一員。焦糖色素廣泛用于醬油、食醋、料酒、醬鹵、腌制制品、烘制食品、糖果、藥品、碳酸飲料及非碳酸飲料等，并能有效提高產(chǎn)品品質(zhì)。在工業(yè)生產(chǎn)中，直接用糖加工而成的焦糖色素不含有4-甲基咪唑，而當(dāng)前國(guó)內(nèi)外大部分廠家生產(chǎn)的焦糖色素普遍采用氨類化合物作為催化劑，或由糖、氨水及亞硝酸鹽在高壓高溫下生成，稱之為氨法焦糖色素，會(huì)在生產(chǎn)過(guò)程中產(chǎn)生一定劑量的副產(chǎn)物4-甲基咪唑，給人體健康帶來(lái)安全隱患。
2025年食品安全監(jiān)督抽檢實(shí)施細(xì)則，增加了食品添加劑焦糖色的監(jiān)督抽檢，4-甲基咪唑做為焦糖色的重要檢驗(yàn)項(xiàng)目，迪馬科技根據(jù)食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) GB 1886.64-2015 食品添加劑 焦糖色，附錄A.5 4-甲基咪唑的測(cè)定，建立了焦糖色中4-甲基咪唑的測(cè)定方法。選取市場(chǎng)常見(jiàn)的固體和液體焦糖色做為樣品進(jìn)行方法驗(yàn)證，使用成品ProElut® SLE 硅藻土固相支持液-液萃取柱進(jìn)行樣品凈化，提高工作效率，根據(jù)樣品的性質(zhì)及前處理情況，提供ProElut® SLE 20mL, max sample volume(Cat.#: 62506)和ProElut® SLE 10mL, max sample volume(Cat.#: 62505)，兩種萃取柱產(chǎn)品，客戶可根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行選擇。同時(shí)采用DM-WAX 30m x 0.25mm x 0.25μm(Cat.#: 7521)極性氣相色譜柱進(jìn)行分離檢測(cè)，優(yōu)化了程序升溫條件，使每針的樣品及雜質(zhì)均可充分的流出色譜柱，保證結(jié)果的穩(wěn)定性及重現(xiàn)性。供廣大客戶參考！
本方案適用于焦糖色中4-甲基咪唑的測(cè)定。
標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液1000μg/mL (Cat.#: 48591)：精密稱取10mg 4-甲基咪唑于10mL容量瓶中，用丙酮溶解并定容至刻度。
3.1 液體焦糖色
3.1.1 取10g樣品于50mL塑料離心管中，加10mL 3mol/L氫氧化鈉溶液，劇烈振蕩混合1min，使樣品充分溶解，待凈化。
3.1.2 或取5g樣品于50mL塑料離心管中，加5mL 3mol/L氫氧化鈉溶液，劇烈振蕩混合1min，使樣品充分溶解，待凈化。
3.2 固體焦糖色
3.2.1 取5g樣品于50mL塑料離心管中，加20mL 3mol/L氫氧化鈉溶液，劇烈振蕩混合1min，使樣品充分溶解，待凈化。
3.2.2 或取2.5g樣品于50mL塑料離心管中，加10mL 3mol/L氫氧化鈉溶液，劇烈振蕩混合1min，使樣品充分溶解，待凈化。
4.1 將ProElut® SLE 20mL, max sample volume(Cat.#: 62506)固相支持液-液萃取柱放置在SS Rack 6-Ports For ProElut® 60mL Cartridge(Cat.#: 4802)萃取裝置下層，萃取柱下方連接流量控制針頭，將大體積儲(chǔ)液器(Cat.#: 4812)放置在萃取裝置上層，儲(chǔ)液器下方連接可以控制流速的考克(Cat.#: 4806)，關(guān)閉考克，備用。
將待凈化液3.1.1或3.2.1全部轉(zhuǎn)移至萃取柱中，當(dāng)待凈化液全部流入萃取柱中，開(kāi)始計(jì)時(shí)，向上層儲(chǔ)液器中加入70mL二氯甲烷，向待凈化液已轉(zhuǎn)移后的50mL塑料離心管中加入30mL二氯甲烷，充分潤(rùn)洗離心管。萃取柱中液體吸附10min后，將潤(rùn)洗液倒入萃取柱，待篩板上方潤(rùn)洗液即將流干時(shí)，打開(kāi)上層儲(chǔ)液器的考克，使二氯甲烷流入萃取柱，二氯甲烷在萃取柱上始終保持較高位置，繼續(xù)向儲(chǔ)液器中加入200mL二氯甲烷。萃取柱下方使用500mL蒸餾瓶收集全部二氯甲烷洗脫液，待洗脫液流至近干時(shí)，將蒸餾瓶取出，在35℃水浴下減壓蒸餾至約1mL，用丙酮洗滌蒸餾瓶數(shù)次，洗滌液全部轉(zhuǎn)移至5mL容量瓶中，用丙酮定容至刻度，混勻，上機(jī)分析。
4.2 將ProElut® SLE 10mL, max sample volume(Cat.#: 62505)固相支持液-液萃取柱放置在SS Rack 6-Ports For ProElut® 60mL Cartridge (Cat.#: 4802)萃取裝置下層，萃取柱下方連接流量控制針頭，將大體積儲(chǔ)液器(Cat.#: 4812)放置在萃取裝置上層，儲(chǔ)液器下方連接可以控制流速的考克(Cat.#: 4806)，關(guān)閉考克，備用。
將待凈化液3.1.2或3.2.2全部轉(zhuǎn)移至萃取柱中，當(dāng)待凈化液全部流入萃取柱中，開(kāi)始計(jì)時(shí)，向上層儲(chǔ)液器中加入70mL二氯甲烷，向待凈化液已轉(zhuǎn)移后的50mL塑料離心管中加入30mL二氯甲烷，充分潤(rùn)洗離心管。萃取柱中液體吸附10min后，將潤(rùn)洗液倒入萃取柱，待篩板上方潤(rùn)洗液即將流干時(shí)，打開(kāi)上層儲(chǔ)液器的考克，使二氯甲烷流入萃取柱，二氯甲烷在萃取柱上始終保持較高位置，繼續(xù)向儲(chǔ)液器中加入50mL二氯甲烷。萃取柱下方使用500mL蒸餾瓶收集全部二氯甲烷洗脫液，待洗脫液流至近干時(shí)，將蒸餾瓶取出，在35℃水浴下減壓蒸餾至約1mL，用丙酮洗滌蒸餾瓶數(shù)次，洗滌液全部轉(zhuǎn)移至5mL容量瓶中，用丙酮定容至刻度，混勻，上機(jī)分析。
色譜柱：DM-WAX 30m x 0.25mm x 0.25μm (Cat.#: 7521)
進(jìn)樣口溫度：200℃
升溫程序：初始溫度150℃，保持1min，以10℃/min升溫至250℃，保持10min
載氣：氮?dú)猓魉伲?.0mL/min
進(jìn)樣方式：分流進(jìn)樣，分流比：30:1
進(jìn)樣量：1.0μL
ECD：250℃
標(biāo)準(zhǔn)系列工作液：量取1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL、3.0mL、3.5mL、4.0mL及5.0mL 4-甲基咪唑標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液1000μg/mL，分別置于10mL容量瓶中，用丙酮稀釋到刻度，混勻，制得濃度分別為100μg/mL、150μg/mL、200μg/mL、250μg/mL、300μg/mL、350μg/mL、400μg/mL及500μg/mL的4-甲基咪唑標(biāo)準(zhǔn)溶液。
將標(biāo)準(zhǔn)系列工作液分別注入氣相色譜儀中，測(cè)定相應(yīng)物質(zhì)的峰面積，以標(biāo)準(zhǔn)系列工作液中該物質(zhì)的濃度為橫坐標(biāo)，以該物質(zhì)峰面積的響應(yīng)值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
液體焦糖色和固體焦糖色中4-甲基咪唑檢測(cè)的添加回收結(jié)果。
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