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HPLC-ICP-MS 進(jìn)行富硒酵母中含硒蛋白的鑒定
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北京京科瑞達(dá)科技有限公司
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本文建立了有效的 ICP-MS 輔助蛋白質(zhì)組學(xué)方法，用于鑒定市售富硒酵母樣品不溶性硒組分中的含硒蛋白。采用雙向凝膠電泳分離含硒蛋白，并用胰蛋白酶進(jìn)行裂解。采用LA-ICP-MS、毛細(xì)管 HPLC-ICP-MS 和 ESI MS/MS 組合方法對(duì)裂解產(chǎn)物進(jìn)行鑒定、分析和表征。由于胰酶裂解產(chǎn)物量非常少，所以需要使用毛細(xì)管色譜。采用本方法鑒定出了甘油醛-3-磷酸酯脫氫酶-3，這是富硒酵母中的主要含硒蛋白。證明由于蛋白鏈中的硫-硒取代途徑而引入硒，存在于蛋氨酸 (M) 和半胱氨酸 (C) 殘基中，后者在酵母樣品中*發(fā)現(xiàn)。
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