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關(guān)于尺寸排阻的保存及清洗你需要知道的

閱讀：2566 發(fā)布時(shí)間：2021-4-26

　　尺寸排阻是按分子大小順序進(jìn)行分離的一種色譜方法，體積大的分子不能滲透到凝膠孔穴中去而被排阻，較早的淋洗出來(lái)；中等體積的分子部分滲透；小分子可*滲透入內(nèi)，后洗出色譜柱。樣品分子基本按其分子大小先后排阻，從柱中流出。被廣泛應(yīng)用于大分子分級(jí)，即用來(lái)分析大分子物質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的分布。

　　尺寸排阻色譜柱的保存：日常使用中，SepaxSEC色譜柱建議保存在150mM磷酸鹽緩沖液中(pH7.0)。如長(zhǎng)期不用時(shí)，可將色譜柱保存至20%乙醇中，以防止菌體污染。(注：可根據(jù)具體使用條件選擇保存方式，如實(shí)驗(yàn)條件為緩沖鹽體系，建議保存在150mM磷酸鹽緩沖液中，pH7.0。若實(shí)驗(yàn)條件為有機(jī)溶劑體系，建議保存在20%乙醇中。)

　　尺寸排阻色譜柱的清洗：多次使用后某些樣品可能會(huì)吸附到入口篩板或填料上，當(dāng)積累至一定程度時(shí)會(huì)出現(xiàn)壓力升高并伴隨峰型展寬的現(xiàn)象，此時(shí)需要清洗色譜柱。一般流程為：斷開(kāi)檢測(cè)器，反接色譜柱，在低于50%大推薦流速下用清洗液沖洗10-15倍柱體積。一般有：

　　0.5M硫酸鈉溶液(pH3.0)：適用于堿性蛋白的清洗；

　　10%-20%有機(jī)溶劑(乙醇、異丙醇、乙腈)：疏水性蛋白的清洗；

　　4M尿素(pH7.0)：適用于易聚集蛋白樣品的清洗。

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