1．分光光度計(jì)使用前，使用者應(yīng)該首先了解本儀器的結(jié)構(gòu)和工作原理。以及各個(gè)操作旋鈕之功能。在未接通電源前，應(yīng)該對(duì)儀器的安全性進(jìn)行檢查，電源線(xiàn)接線(xiàn)應(yīng)牢固。通地要良好，各個(gè)調(diào)節(jié)旋鈕的起始位置應(yīng)該正確，然后再接通電源開(kāi)關(guān)。儀器在使用前先檢查一下，放大器暗盒的硅膠干燥筒（在儀器的左側(cè)），如受潮變色，應(yīng)更換干燥的藍(lán)色硅膠或者倒出原硅膠，烘干后再用。
　　
　　2．將靈敏度旋鈕調(diào)置“1”檔（放大倍率zui小）。
　　
　　3．開(kāi)啟電源，指示燈亮，選擇開(kāi)關(guān)置于“T”，波長(zhǎng)調(diào)至測(cè)試用波長(zhǎng)。儀器預(yù)熱20分鐘。
　　
　　4．打開(kāi)試樣室蓋（光門(mén)自動(dòng)關(guān)閉），調(diào)節(jié)“0”旋鈕，使數(shù)字顯示為“00.0”，蓋上試樣室蓋，將比色皿架置與蒸餾水校正位置，使光電管受光，調(diào)節(jié)透過(guò)率“100%”旋鈕，使數(shù)字顯示為“100.0”。
　　
　　5．如果顯示不到“100.0”，則可適當(dāng)增加微電流放大器的倍率檔數(shù)，但盡可能置低倍率檔使用，這樣儀器將有更高的穩(wěn)定性。但改變倍率后必須按（4）重新校正“0”和“100%”。
　　
　　6．預(yù)熱后，按（4）連續(xù)幾次調(diào)整“0”和“100%”，儀器即可進(jìn)行測(cè)定工作。
　　
　　7．吸光度A的測(cè)量按（4）調(diào)整儀器的“00.0”和“100%”，將選擇開(kāi)關(guān)置于“A”，調(diào)節(jié)吸光度調(diào)零旋鈕，使得數(shù)字顯示為“.000”，然后將被測(cè)樣品移入光路，顯示值即為被測(cè)樣品的吸光度值。
　　
　　8．濃度C的測(cè)量：選擇開(kāi)關(guān)由“A”旋置“C”，將已標(biāo)定濃度的樣品放入光路，調(diào)節(jié)濃度旋鈕，使得數(shù)字顯示為標(biāo)定值，將被測(cè)樣品放入光路，即可讀出被測(cè)樣品的濃度值。
　　
　　9．如果大幅度改變測(cè)試波長(zhǎng)時(shí)，在調(diào)整“0”和“100%”后稍等片刻，（因光能量變化急劇，光電管受光后響應(yīng)緩慢，需一段光響應(yīng)平衡時(shí)間），當(dāng)穩(wěn)定后，重新調(diào)整“0”和“100%”即可工作。吸收池（即比色杯）使用注意事項(xiàng)：
　　
　?、僖?清洗，尤其是盛過(guò)蛋白質(zhì)等溶液，干后形成一層膜，不易洗去，通常杯子不用時(shí)可放在
　　
　　1％洗潔凈液中浸泡，去污效果好，使用時(shí)用水沖洗干凈，要求杯壁不掛水珠，還可以用綢布絲線(xiàn)或軟塑料制作一個(gè)小刷子清洗杯子。
　　
　?、趪?yán)禁用手指觸摸透光面，因指紋不易洗凈。嚴(yán)禁用硬紙和布擦拭透光面，只能使用鏡頭紙和綢布。
　　
　?、蹏?yán)禁加熱烘烤。急用干的杯子時(shí)，可用酒精蕩洗后用冷風(fēng)吹干。決不可用超聲波清洗器清洗。
　　
　　④吸收池的校正：要固定參比杯和樣品杯，可在杯的毛玻璃面上寫(xiě)上記號(hào)。用盛有參比液的參比杯和樣品杯測(cè)定吸光度“A0”，樣品杯換上樣品液后測(cè)定的吸光度為“A1”，則校正后的實(shí)際吸光度A為：A=A1－A0