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技術(shù)文章

實驗動物的處死方法

點擊次數(shù):3650 發(fā)布時間:2009-11-25

緩沖液

使用液

濃貯存液(每升)

Tris-乙酸(TAE)

1×:0.04mol/L Tris-乙酸

50×:242g Tris堿

 

0.001mol/L EDTA

57.1ml冰乙酸

 

 

100ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

Tris-磷酸(TPE)

1×:0.09mol/L Tris-磷酸

10×:10g Tris堿

 

0.002mol/L EDTA

15.5ml85%磷酸(1.679g/ml)

 

 

40ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

Tris-硼酸(TBE)a

0.5×0.045mol/L Tris-硼酸

5×:54g Tris堿

 

0.001mol/L EDTA

27.5硼酸

 

 

20ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

堿性緩沖液b

1×:50mmol/L NaOH

1×:5ml 10mol/L NaOH

 

1mmol/L EDTA

2ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)

Tris-甘氨酸c

1×:25mmol/L Tris

5×:15.1g Tris

 

250mmol/L 甘氨酸

94g 苷氨酸(電泳級)(pH8.3)

 

0.1% SDS

50ml 10% SDS(電泳級)

緩沖液

使用液

濃貯存液(每升)

Tris-乙酸(TAE)

1×:0.04mol/L Tris-乙酸

50×:242g Tris堿

 

0.001mol/L EDTA

57.1ml冰乙酸

 

 

100ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

Tris-磷酸(TPE)

1×:0.09mol/L Tris-磷酸

10×:10g Tris堿

 

0.002mol/L EDTA

15.5ml85%磷酸(1.679g/ml)

 

 

40ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

Tris-硼酸(TBE)a

0.5×0.045mol/L Tris-硼酸

5×:54g Tris堿

 

0.001mol/L EDTA

27.5硼酸

 

 

20ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

堿性緩沖液b

1×:50mmol/L NaOH

1×:5ml 10mol/L NaOH

 

1mmol/L EDTA

2ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)

Tris-甘氨酸c

1×:25mmol/L Tris

5×:15.1g Tris

 

250mmol/L 甘氨酸

94g 苷氨酸(電泳級)(pH8.3)

 

0.1% SDS

50ml 10% SDS(電泳級)

緩沖液

使用液

濃貯存液(每升)

Tris-乙酸(TAE)

1×:0.04mol/L Tris-乙酸

50×:242g Tris堿

 

0.001mol/L EDTA

57.1ml冰乙酸

 

 

100ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

Tris-磷酸(TPE)

1×:0.09mol/L Tris-磷酸

10×:10g Tris堿

 

0.002mol/L EDTA

15.5ml85%磷酸(1.679g/ml)

 

 

40ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

Tris-硼酸(TBE)a

0.5×0.045mol/L Tris-硼酸

5×:54g Tris堿

 

0.001mol/L EDTA

27.5硼酸

 

 

20ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

堿性緩沖液b

1×:50mmol/L NaOH

1×:5ml 10mol/L NaOH

 

1mmol/L EDTA

2ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)

Tris-甘氨酸c

1×:25mmol/L Tris

5×:15.1g Tris

 

250mmol/L 甘氨酸

94g 苷氨酸(電泳級)(pH8.3)

 

0.1% SDS

50ml 10% SDS(電泳級)

實驗動物的處死方法很多,應(yīng)根據(jù)動物實驗?zāi)康?、實驗動物品種(品系)、以及需要采集標本的部位等因素,選擇不同的處死方法。無論采用哪一種方法,都應(yīng)遵循安樂死的原則。

安樂死是指在不影響動物實驗結(jié)果的前提下,使實驗動物短時間無痛苦地死亡。

處死實驗動物時應(yīng)注意,首先要保證實驗人員的安全;其次要確認實驗動物已經(jīng)死亡,通過對呼吸、心跳、瞳孔、神經(jīng)反射等指征的觀察,對死亡作出綜合判斷;再者要注意環(huán)保,避免污染環(huán)境,還要妥善處理好尸體。

一、頸椎脫臼處死法

此法是將實驗動物的頸椎脫臼,斷離脊髓致死,為大、小鼠zui常用的處死方法。操作時實驗人員用右手抓住鼠尾根部并將其提起,放在鼠籠蓋或其他粗糙面上,用左手拇指、食指用力向下按壓鼠頭及頸部,右手抓住鼠尾根部用力拉向后上方,造成頸椎脫臼,脊髓與腦干斷離,實驗動物立即死亡。

二、斷頭處死法

此法適用于鼠類等較小的實驗動物。操作時,實驗人員用左手按住實驗動物的背部,拇指夾住實驗動物右腋窩,食指和中指夾住左前肢,右手用剪刀在鼠頸部垂直將鼠頭剪斷,使實驗動物因腦脊髓斷離且大量出血死亡。

三、擊打頭蓋骨處死法

主要用于豚鼠和兔的處死。操作時抓住實驗動物尾部并提起,用木錘等硬物猛烈打擊實驗動物頭部,使大腦中樞遭到破壞,實驗動物痙攣并死亡。

四、放血處死法

此法適用于各種實驗動物。具體做法是將實驗動物的股動脈、頸動脈、腹主動脈剪斷或剪破、刺穿實驗動物的心臟放血,導(dǎo)致急性大出血、休克、死亡。

犬、猴等大動物應(yīng)在輕度麻醉狀態(tài)下,在股三角做橫切口,將股動脈、股靜脈全部暴露并切斷,讓血液流出。操作時用自來水不斷沖洗切口及血液,既可保持血液暢流無阻,又可保持操作臺清潔,使實驗動物急性大出血死亡。

五、空氣栓塞處死法

處死兔、貓、犬常用此法。向?qū)嶒瀯游镬o脈內(nèi)注入一定量的空氣,形成肺動脈或冠狀動脈空氣栓塞,或?qū)е滦那粌?nèi)充滿氣泡,心臟收縮時氣泡變小,心臟舒張時氣泡變大,從而影響回心血液量和心輸出量,引起循環(huán)障礙、休克、死亡。空氣栓塞處死法注入的空氣量,貓和兔為20~50ml,犬為90~160ml。

六、過量麻醉處死法

此法多用于處死豚鼠和家兔??焖龠^量注射非揮發(fā)性麻醉藥(投藥量為深麻醉時的30倍),或讓動物吸入過量的乙醚,使實驗動物中樞神經(jīng)經(jīng)過過度抑制,導(dǎo)致死亡。

七、毒氣處死法

讓實驗動物吸入大量CO2等氣體而中毒死亡。


 

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