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上海同田生物技術(shù)股份有限公司 上海同田生物技術(shù)股份有限公司
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高速逆流色譜儀的儀器構(gòu)造介紹

閱讀:1911發(fā)布時(shí)間:2022-7-19

高速逆流色譜(high speed countercurrentchromatography,簡稱HSCCC)是一種液-液色譜分離技術(shù),它的固定相和流動相都是液體,沒有不可逆吸附,具有樣品無損失、無污染、高效、快速和大制備量分離等優(yōu)點(diǎn)。由于HSCCC與傳統(tǒng)的分離純化方法相比具有明顯的優(yōu)點(diǎn),因此此項(xiàng)技術(shù)己被廣泛應(yīng)用于中藥成分分離、保健食品、生物化學(xué)、生物工程、天然產(chǎn)物化學(xué)、有機(jī)合成、環(huán)境分析等領(lǐng)域。
儀器構(gòu)造
儀器的中心部分:(a) ITO多層線圈分離柱,它是由100-200毫米長、內(nèi)徑為1.6mm左右的聚四氟乙烯管沿具有適當(dāng)內(nèi)徑的內(nèi)軸共繞十多層而成,其管內(nèi)總體積可達(dá)300mL左右。(b)平衡器,它可以調(diào)節(jié)重量,它的作用是讓(a), (b)相對于中心軸兩邊重量平衡。當(dāng)在旋轉(zhuǎn)控制器的控制下,在齒輪傳動裝置作用下,(a),(b)同時(shí)繞中心軸作順時(shí)針或反時(shí)針的行星運(yùn)動,即(a)- (b)本身既在自轉(zhuǎn),但同時(shí)又在繞中心軸公轉(zhuǎn),公轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)速可從0-4000r/min。從線圈分離柱中通過中空的中心軸還同時(shí)牽引出了線圈的兩端,一端供泵入液用,一端輸出液體。儀器工作需要互不相溶的兩種液體,一相作固定相, 一相作移動相。儀器工作前,先將作為固定相一相的液體通過恒流泵壓入線圈分離柱,然后用進(jìn)樣器將待分離的樣品進(jìn)樣,*后用恒流泵壓入移動相,同時(shí)啟動中心部分運(yùn)轉(zhuǎn)直到轉(zhuǎn)速大于600r/min。此時(shí),兩相在線圈分離柱中具有相對運(yùn)動之勢。由于移動相源源不斷的壓入,阻止了固定相的流出,同時(shí),移動相帶著樣品在線圈分離柱中進(jìn)行無限次的分配而使復(fù)雜樣品得到分離。當(dāng)移動相經(jīng)過檢測器時(shí),由于不同的樣品組分會產(chǎn)生不同大小的信號,用記錄儀就能得到逆流色譜圖譜,同時(shí)用餾分收集器分步收集移動相就會得到復(fù)雜樣品被分開的組分。較大的制備型HSCCC,柱容積可達(dá)530m1,一次*多進(jìn)樣可達(dá)20g粗品;較小的分析型的HSCCC柱容積為8m1,進(jìn)樣量為幾十微克,*大轉(zhuǎn)速可達(dá)4000r/min。
高速逆流色譜的原理
1.逆流色譜是20世紀(jì)50年代源于多極萃取技術(shù)(非連續(xù)性)但是多極萃取設(shè)備*大復(fù)雜、易碎、溶劑體系容易乳化,溶劑耗量大,分離時(shí)間長。
2. 通過公轉(zhuǎn)、自轉(zhuǎn)(同步行星式運(yùn)動)產(chǎn)生的二維力場,保留兩相中的其中一相作為固定相。
2.通過高速旋轉(zhuǎn)提高兩相溶劑的萃取頻率,1000rpm旋轉(zhuǎn)時(shí)可達(dá)到17次/s頻率的萃取過程。 

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