白介素4（IL-4）的誘生

    IL-4主要是TH細胞經(jīng)抗原或絲裂原刺激后產(chǎn)生，可調(diào)節(jié)B細胞及其他多種免疫細胞的功能。制備IL-4多取用正常組織細胞（如人脾臟、扁桃體、淋巴結(jié)）、外周血和大鼠或小鼠脾臟細胞等，傳代細胞（如小鼠胸腺瘤細胞系EL-4細胞、L1／1細胞、MBI-1T細胞系）和一些T細胞雜交瘤，經(jīng)抗原或非特異性激活劑刺激后獲得。

    IL-4的誘生可用如下途徑

    1．EL-4細胞經(jīng)TPA或與ConA協(xié)同刺激時，可產(chǎn)生價IL-2和IL-4。

    2．L1／I細胞用特異性抗原或針對CD3分子的抗體刺激后，可產(chǎn)生IL-3、IL-4、IL-5、IL-6，而不產(chǎn)生IL-2、IFN-r。

    3．用ConA誘導(dǎo)Swiss小鼠或其他品系小鼠脾細胞制備IL-4。

    4．外周血淋巴細胞（peripheralbloodlymphocyte，PBL）培養(yǎng)上清。

    （1）取肝素抗凝血10mL，用生理鹽水稀釋1倍，置淋巴細胞分層液上面，離心制備淋巴細胞懸液。

    （2）調(diào)整細胞濃度為1X 106／mL，同時加入PHA 100／le／mL或TPA 1ng／mL和A23187（鈣離子載體）0．1ug／mL，培養(yǎng)液為8％NBS-IMDM或1％人AB血清-IMDM，37℃，5％C02溫箱中培養(yǎng)24h。

    （3）離心，分離上清、濾過、分裝、—20~C保存。

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