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更新時間:2025-05-09 21:00:07
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副溶血弧菌的快速檢驗(yàn)方法
1 適用范圍:用于各類食品和原料中副溶血弧菌的檢測,以及突發(fā)事件應(yīng)急檢測需要。
2 方法原理:采用一種商品化的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品,含有高選擇性培養(yǎng)基、吸水凝膠和特異酶指示劑等重要成分,培養(yǎng)15~24小時就可確認(rèn)是否有副溶血弧菌的存在。
3 操作方法
3.1 樣品處理:取樣品 25 mL(g)放入含有225 mL滅菌生理鹽水的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),充分振搖或置均質(zhì)器中制成1:10的樣品勻液。
3.2 接種:將測試片置于平坦實(shí)驗(yàn)臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置5 min使培養(yǎng)基凝固,zui后用手輕輕地壓一下。每個樣品接種2片。
3.3 培 養(yǎng): 將測試片疊在一起放回原自封袋中,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。
3.4 結(jié)果判別:呈紫紅色的菌落為副溶血弧菌。多數(shù)非目的菌在測試片上不生長,少數(shù)能生長,如創(chuàng)傷弧菌和霍亂弧菌,但菌落呈藍(lán)色,明顯區(qū)別于目的菌。對于出現(xiàn)陽性菌落的樣品,用其他方法作進(jìn)一步的鑒定。
4 附加說明
4.1 汕頭*技術(shù)中心的對比試驗(yàn)結(jié)果表明,副溶血弧菌測試片具有較高的檢測靈敏度和準(zhǔn)確性,對純菌的檢測靈敏度達(dá)到8cfu/mL,與SN標(biāo)準(zhǔn)方法符合率達(dá)到90%以上。
4.2 注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理 。
4.3 出現(xiàn)陽性菌落的樣本,用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證,沒有條件的話至少再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。
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