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水產(chǎn)品中孔雀石綠固相萃取凈化方法

閱讀:4345        發(fā)布時(shí)間:2010-5-21

 

水產(chǎn)品中孔雀石綠固相萃取凈化方法
1. 樣品前處理
稱(chēng)取5.00g切碎的樣品,依次加入1mL鹽酸羥胺(0.25g/mL)溶液、2mL對(duì)-甲苯磺酸(1.0mol/L)溶液、2mL乙酸銨緩沖溶液(0.1mol/L)和40mL乙腈,勻漿2min (10000r/min),離心3min(3000r/min),將上清液轉(zhuǎn)移到250mL分液漏斗中,用20mL乙腈重復(fù)提取殘?jiān)淮危喜⑸锨逡?。于分液漏斗中加?0mL二氯甲烷、35mL水,振搖2min,靜置分層,收集下層有機(jī)層,再用20mL二氯甲烷萃取一次,合并二氯甲烷萃取液,45℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)近干。
2. SPE凈化
a. 活化:PRS柱,依次用3mL乙腈、3mL甲酸溶液活化;中性氧化鋁柱,用5mL乙腈活化;
b. 上樣:將中性氧化鋁柱AL-N串接在PRS柱上方。用6mL乙腈分三次(每次2mL)用旋渦震蕩器渦旋溶解上述提取物,并依次過(guò)柱,控制柱流速不超過(guò)0.6mL/min;
c. 淋洗:再用2mL乙腈淋洗中性氧化鋁柱后,棄去中性氧化鋁柱。依次用3mL 2%(v/v)甲酸溶液、3mL乙腈淋洗PRS柱,棄去流出液;
d. 洗脫:用4mL5%(v/v)乙酸銨甲醇溶液洗脫,洗脫流速為1mL/min,用10mL刻度試管收集洗脫液,用水定容至10.0mL,樣液經(jīng)0.2μm濾膜過(guò)濾,待測(cè)。
3. HPLC-MS/MS檢測(cè)
液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜條件
a) 色譜柱:Pursuit C18柱,50mm×2.1mm×3μm;
b) 流動(dòng)相:乙腈:5mmol/L乙酸銨(75:25, v/v);
c) 流速:0.2mL/min;
d) 柱溫:35℃;
e) 進(jìn)樣量:10μL;
f ) 離子源: ESI,正離子;
g) 掃描方式:多反應(yīng)監(jiān)測(cè)MRM。
4. 樣品組分
孔雀石綠、氘代孔雀石綠、結(jié)晶紫、氘代隱色孔雀石綠、隱色孔雀石綠和隱色結(jié)晶紫
本方法中使用的SPE柱:
Bond Elut PRS(500mg,3mL, PN.12102039)和Bond Elut AL-N(1g,6mL, PN. 12256086 )。
Tips:
本方法滿(mǎn)足國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)關(guān)于水產(chǎn)品中孔雀石綠檢測(cè)的要求!
 
我公司可提供產(chǎn)品: Bond Elut PRS(500mg,3mL, PN.12102039)
                                    Bond Elut AL-N(1g,6mL, PN. 12256086 )
北京東方惠普科技有限公司
詳情可致電:010-820178366/68
:徐兢苑
 
 

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