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上海一基實(shí)業(yè)有限公司

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當(dāng)前位置：首頁 >> 資料下載 >> Y12662A雞促卵泡素（FSH）ELISA試劑盒使用說明書

產(chǎn)品分類品牌分類

教學(xué)耗材試劑盒: 特色試劑盒

生物試劑: 化學(xué)試劑標(biāo)準(zhǔn)品對照品其他生化試劑抗體類測試盒類培養(yǎng)基類緩沖劑類表面活性劑分離材料及耗材維生素類色素類碳水化合物類植物激素及核酸類抗生素類蛋白質(zhì)類酶類氨基酸

低溫恒溫槽: DF-101S型集熱式磁力攪拌器高溫恒溫油浴高溫循環(huán)器低溫恒溫循環(huán)器高精度恒溫水槽.恒溫油槽高精度低溫恒溫槽低溫冷卻液循環(huán)泵（機(jī)）恒溫液循環(huán)泵（機(jī)）超級恒溫水槽.恒溫油槽低溫恒溫槽

制冰機(jī): 層析冷柜雪花制冰機(jī)

超聲波清洗機(jī): 超聲波細(xì)胞粉碎機(jī) 超聲波清洗機(jī)

對照品: 生化試劑

糖度計，折光儀: 糖度計，折光儀，折射儀

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器: 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器RE-52A

干燥箱: 真空干燥箱紅外線快速干燥箱

試劑盒: ELISA試劑盒

耗材設(shè)備: 硅膠板

熱銷產(chǎn)品

熱銷產(chǎn)品2

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Y12662A雞促卵泡素（FSH）ELISA試劑盒使用說明書

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本公司專業(yè)供應(yīng)Elisa試劑盒，種屬齊全，現(xiàn)貨，質(zhì)量有保證。
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：www.hdl17.com http://hdlsw.testmart.cn

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：1070885359， 727675375

雞促卵泡素（FSH）ELISA試劑盒使用說明書

實(shí)驗(yàn)原理：

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中雞促卵泡素（ FSH）水平。用純化的雞促卵泡素（FSH）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入促卵泡素（ FSH），再與 HRP標(biāo)記的 FSH抗體結(jié)合，形成抗體 -抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在 HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促卵泡素（ FSH）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm波長下測定吸光度（ OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中雞促卵泡素（ FSH）濃度。
試劑盒組成：

試劑盒組成	48孔配置	96孔配置	保存
說明書	1份	1份
封板膜	2片（48）	2片（96）
密封袋	1個	1個
酶標(biāo)包被板	1×48	1×96	2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品：1350ng/L	0.5ml×1瓶	0.5ml×1瓶	2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液	1.5ml×1瓶	1.5ml×1瓶	2-8℃保存
酶標(biāo)試劑	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
樣品稀釋液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
顯色劑A液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
顯色劑B液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
終止液	3ml×1瓶	6ml×1瓶	2-8℃保存
濃縮洗滌液	（20ml×20倍）×1瓶	（20ml×30倍）×1瓶	2-8℃保存

樣本處理及要求：

1.血清：室溫血液自然凝固 10-20分鐘，離心 20分鐘左右（ 2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇 EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合 10-20分鐘后，離心 20分鐘左右（ 2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

3.尿液：用無菌管收集，離心 20分鐘左右（ 2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心 20分鐘左右（ 2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用 PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞

濃度達(dá)到 100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心 20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的 PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心 20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于 -20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融 .

7. 不能檢測含 NaN3的樣品，因 NaN3抑制辣根過氧化物酶的（ HRP）活性。

操作步驟

1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔 10孔，在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品 100μl，然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取 100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取 50μl棄掉，再各取 50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取 50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取 50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50μl，混勻后從第九第十孔中各取 50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為 50μl，濃度分別為 9IU/L，6IU/L，3IU/L，1.5IU/L， 0.75IU/L）。

2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl（樣品zui終稀釋度為 5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 3 0分鐘。

4.配液：將 30（48T的 20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30（48T的 20倍）倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30秒后棄去，如此重復(fù) 5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同 3。

8.洗滌：操作同 5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻， 37℃避光顯色15分鐘.

10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11.測定：以空白空調(diào)零， 450nm波長依序測量各孔的吸光度（ OD值）。測定應(yīng)在加終止液后 15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

注意事項：

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時間控制在 5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4．請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本 OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的 OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（ n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請避光保存。

7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn) .

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用。 10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。

計算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)， OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的 OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與 OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的 OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。

（此圖僅供參考）

試劑盒性能：

1. 樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù) R值為 0.95以上。

2. 批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于 9%和 11%

檢測范圍：

0.5IU/L -10IU/L

保存條件及有效期：

1 2-8℃。

2 6個月



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