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油紅O染色步驟有哪些

閱讀:7255      發(fā)布時間:2016-5-23
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油紅O染色液主要由油紅O異丙醇飽和液組成,利用染料易溶于脂質的性質證明組織脂質含量的多少。適用于細胞學與組織學研究的切片觀察.但滲透慢,不能長期保存;冰凍切片附貼于載玻片后,立即放入恒冷箱中的固定液固定1分鐘后即可染色。染色后脂滴呈橘紅色。下面來了解一下油紅O染色步驟有哪些。
油紅O染色步驟
試劑:
0.5%的油紅O溶液
配方(100ml): 油 紅O : 1.5g
70%乙醇 : 50ml
丙酮 : 50ml
需要的其他試劑:異丙醇、乙醇、丙酮、蘇木素(hematoxylin)
油紅O染色步驟:
1.將冰凍切片(厚度為4-8um)常溫干燥15-20min.
2.100%異丙醇孵育5分鐘(避免把水帶入油紅O)。
3.0.5%的油紅O溶液孵育7-8分鐘(在60 oC烤箱)
4.85%異丙醇溶液洗3分鐘
5.雙脫水洗。
6.蘇木素染1-1.5min。
7.雙脫水洗。
8.封片劑封片
結果: 脂質呈紅色或者橘黃色
細胞核呈淡藍色
油紅O染色步驟注意事項:
1 由于脂肪易溶于有機溶劑,所以一般用冰凍切片染色來顯示。
2 作脂肪染色的冰凍切片不能太薄,過薄的切片常會使脂質丟失。
3 蘇木素復染時間不能過長。
4 染色結果不能長期保存,應盡快觀察。

以上便是油紅O染色步驟,油紅O染色常用作染脂肪。脂類染色法常用以證明脂肪變性,脂肪栓子以及腫瘤的鑒別。脂類染色使用廣泛的染料是蘇丹染料,常用的有蘇丹Ⅲ,蘇丹Ⅳ,蘇丹黑及油紅O等。脂肪被染色,實際上是蘇丹染料被脂肪溶解吸附而呈現(xiàn)染料的顏色。脂類染色,用冰凍或石蠟切片,以水溶性封固劑封固,如甘油明膠和阿拉伯糖膠等。

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