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貨物所在地:北京北京市
所在地: 北京
更新時(shí)間:2024-12-15 21:00:07
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貨號(hào):G1060 |
規(guī)格:10ml/100ml |
保存:陰涼處保存,保質(zhì)期 1 年。 |
革蘭氏染色劑產(chǎn)品內(nèi)容:
結(jié)晶紫;碘液;95%酒精;蕃紅。
產(chǎn)品簡介:
革蘭氏染色法是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法,通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后,在細(xì)胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物,革蘭氏陽性菌細(xì)胞壁較厚,肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密,乙醇脫色時(shí),肽聚糖脫水使孔徑縮小,故保留結(jié)晶紫-碘復(fù)合物在細(xì)胞膜上,呈紫色。革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差,脫色后類脂外膜迅速溶解,縫隙加大,結(jié)晶紫與碘復(fù)合物溶出,因此乙醇脫色后再經(jīng)番紅復(fù)染,呈紅色。
革蘭氏染色劑操作步驟:
1. 涂片固定
菌液涂片時(shí)不可過于濃厚,干燥、固定。固定時(shí)通過火焰 1-2 次即可,不可過熱,以載玻片不燙手為宜。
2. 染色
一般包括初染、媒染、脫色、復(fù)染等四個(gè)步驟,具體操作方法是:
(1)加上結(jié)晶紫后,染色 1 分鐘,水洗。
(2)加上碘液后染色 1 分鐘,水洗。
(3)加上 95%酒精,搖動(dòng)玻片,根據(jù)涂片厚度,脫色約 20-60 秒,水洗,吸去水分。
(4)加上蕃紅后,染色 1 分鐘,水洗。
(5)吸干或在空氣中涼干后,油鏡鏡檢。
革蘭氏染色的關(guān)鍵在于嚴(yán)格掌握酒精脫色程度,如脫色過度,則陽性菌可被誤染為陰性菌;而脫色不夠時(shí),陰性菌可被誤染為陽性菌。此外,菌齡也影響染色結(jié)果,如陽性菌培養(yǎng)時(shí)間過長,或已死亡及部分菌體自行溶解,都常呈陰性反應(yīng)。
3. 結(jié)果觀察:革蘭氏陰性菌呈紅色,革蘭氏陽性菌呈紫色。以均勻分散開的細(xì)菌的革蘭氏染色反應(yīng)為準(zhǔn),過于密集的細(xì)菌,常常呈現(xiàn)假陽性。
注意事項(xiàng):
1.標(biāo)本涂片不能太厚,嚴(yán)格按操作要求進(jìn)行。若涂片較厚,應(yīng)延長脫色時(shí)間,直不再出現(xiàn)紫色為止。
2.玻片通過火焰溫度不能太高。
3.碘液變透明,則不能使用。
4.水洗時(shí)動(dòng)作要輕柔,沿載玻片對角線方向用洗瓶沖洗,以免把菌體沖掉。
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