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貨物所在地:北京北京市
所在地: 北京
更新時(shí)間:2024-12-14 21:00:07
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蛋白質(zhì)提取試劑非變性組織/細(xì)胞裂解液
貨號(hào):R0030
規(guī)格:100ml,本產(chǎn)品配有一支 PMSF(1.5ml)
保存:4℃保存,有效期 1 年,長(zhǎng)期保存可置于-20℃。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
非變性組織/細(xì)胞裂解緩沖液內(nèi)含非離子型去垢劑,能裂解細(xì)胞并在非變性條件下釋放胞漿蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。非變性條件下的裂解蛋白產(chǎn)物大限度地保留了蛋白的特性和功能,如抗原-抗體結(jié)合或酶學(xué)活性,因此適宜于進(jìn)行免疫共沉淀。另外,有些抗體對(duì)非變性蛋白具有更高的結(jié)合能力或只能識(shí)別非變性蛋白的抗原位點(diǎn),這種情況應(yīng)該使用非變性裂解。
使用說(shuō)明:
根據(jù)使用量,取每 1ml 裂解液加入 10ul PMSF,使 PMSF 的終濃度為 1mM?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。
1、樣品前處理:
a)對(duì)于貼壁細(xì)胞: 去除培養(yǎng)液, 用 PBS、 生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍。 按照 6 孔板每孔加入 150-250ul裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸,冰上放置裂解 5-10 分鐘。
b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液,冰上放置裂解 5-10 分鐘。期間可以用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管,然后再裂解。
c)對(duì)于組織樣品:把組織剪切成細(xì)小的碎片。按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量) 。 用玻璃勻漿器勻漿,直充分裂解。
2、后處理:
充分裂解后,將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、Western 和免疫沉淀、免疫共沉淀等操作。
注意事項(xiàng):
為取得適宜的使用效果,盡量避免過(guò)多的反復(fù)凍融??梢赃m當(dāng)分裝后使用。裂解樣品的所有步驟都需在冰上或 4℃進(jìn)行。裂解時(shí)間可根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行優(yōu)化處理。
非變性蛋白裂解液裂解得到的蛋白樣品, 可以用 BCA 蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度。 由于含有較高濃度的 Triton X-100 等干擾物質(zhì),不能用 Bradford 法測(cè)定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
相關(guān)產(chǎn)品:
P1020 1×PBS , PH7.2-7.4 , 0.01M
P1017 4× 非變性蛋白上樣緩沖液
PR1400 低分子量蛋白 MARKER
PR1500 次高分子量蛋白 MARKER
PC0020 BCA 法蛋白濃度測(cè)定試劑盒
蛋白質(zhì)提取試劑非變性組織/細(xì)胞裂解液訂購(gòu)說(shuō)明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。
4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整,部分城市可到17點(diǎn)整,因超過(guò)截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請(qǐng)辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。
蛋白質(zhì)提取試劑非變性組織/細(xì)胞裂解液運(yùn)輸說(shuō)明:
1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來(lái),再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來(lái),再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中無(wú)需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫(kù)房人員快速配貨,準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。
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