国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

上海研謹生物科技有限公司

一氧化氮 (Nitric oxide ,NO) 含量測定試劑盒說明書微量法

時間:2024-4-12閱讀:1007
分享:

化氮 (Nitric oxide NO) 含量測定試劑盒說明書

量法

:正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

定意義:

NO  (Nitric Oxide NO) 廣泛分布于生物體內(nèi)神經(jīng)、循環(huán)、呼吸、消化、泌尿生殖等系統(tǒng) 中,特是神經(jīng)組織中較豐富。它作為細胞間及細胞內(nèi)的信息物質(zhì),發(fā)揮信號傳遞的作用,是 種新型的生物信使分子,在機體的生理、病理過程中起著重要的作用。

定原理:

NO在體內(nèi)水溶液中極易氧化生成 NO2-,在酸性條件下,NO2-與重氮鹽磺酸胺生成重氮 化合物,進一步與萘基乙烯基二胺偶合,產(chǎn)物在550nm處有特征吸收峰,測定其吸光值,可 計算NO含量。為了排除樣品色素等的影響,每個樣品需做對照管。

自備實驗用品及儀器:

天平、研缽或勻漿器、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96  孔板、蒸餾水。

劑組成和配制:

液:液體 100mL×1  瓶,4℃保存。

試劑一:液體 3mL×1  瓶,4℃避光保存。

二:液體 3mL×1  瓶,4℃保存。

試劑三:液體 6mL×1  瓶,4℃避光保存。

品處理:

1.  組織:按照組織質(zhì)量 (g) :提取液體積(mL)15~ 10的比例 (建議稱取約0. 1g組織,加入 1mL提取液) 進行冰浴勻漿。10000g 4℃離心 15min ,取上清,置冰上待測。

2.  細菌、真:按照細胞數(shù)量 (104) :提取液體積 (mL) 為500~ 10001的比例 (建議500 萬細胞1mL提取液) ,冰浴超聲波破碎細胞 (功率300w ,超聲3秒,間隔7秒,總時間 3min ) ;然后10000g ,4℃ ,離心 15min ,取上清置于冰上待測。

3.  體液和培養(yǎng)液等其它液態(tài)樣品:直接測定。

測定步驟和操作表:

1  光光度計或酶標儀預(yù)熱30min 以上,調(diào)節(jié)波長至550nm。

2 、  操作表


對照管

定管

(μL)

100

100

試劑一 (μL)


50

試劑二 (μL)

50


試劑三 (μL)

50

50

勻,4℃室溫靜置 15min ,于微量石英比色皿/96  孔板,對照管調(diào)零,測定 550nm  處吸光 ,記為 A 550  。

NO  含量計算:

a.    用微量石英比色皿測定的計算公式如下


標準曲線歸方程為:y=0.016x-0.0103 ,R2=0. 9986

1 、組織樣品

NO含量義:25℃時,每克樣品或每毫克蛋白15min生成moL NO2-,相當于moL NO

(1) 按樣本質(zhì)量計算

NO  含量 (μmoL/g) =  (A 550 +0.0103) ÷0.016×V  反總÷  (V  ÷V  樣總×W) ×10 -3

= 0. 125×  (A 550 +0.0103) ÷W

(2) 按樣本蛋白濃度計算

NO  含量 (μmoL/mg prot) =  (A 550 +0.0103) ÷0.016×V  反總÷  (V  ×Cpr) ×10 -3 = 0. 125×  (A 550 +0.0103) ÷Cpr

2 、其他樣品:

NO  定義:25℃時,每升樣品15min生成 moL NO2- ,相當于moL NO。 NO   (μmoL/L) =  (A 550+0.0103) ÷0.016×V  反總÷V  

= 125×  (A 550+0.0103)

V  反總反應(yīng)總體積,0.2mL;V  樣:反應(yīng)中樣品體積,0. 1mL;V  樣總:加入提取液體積, 1mL;W:樣品質(zhì)量,g;Cpr:蛋白濃度,mg/mL

b.   96  孔板測定的計算公式如下

標準曲線歸方程為:y= 0.008x-0.0103 ,R2=0. 9986

1 、組織樣品

NO含量義:25℃時,每克樣品或每毫克蛋白15min生成 moL NO2-,相當于moL NO。 (1) 按樣本重量計算

NO  含量 (μmoL/g) =  (A 550 +0.0103) ÷0.008×V  反總÷  (V  ÷V  樣總×W) ×10 -3

= 0.25×  (A 550+0.0103) ÷W

(2) 按樣本蛋白濃度計算

NO  含量 (μmoL/mg prot) =  (A 550+0.0103) ÷0.008×V  反總÷  (V  ×Cpr) ×10 -3 = 0.25×  (A 550+0.0103) ÷ Cpr

2 、細胞

NO  含量定義:25℃時,每104個細胞15min  生成 moL NO2- ,相當于moL NO。

NO  含量 (μmol/104cell) = (A 550+0.0103) ÷0.008×V反總÷ (V÷V樣總×細胞數(shù)量) ×10 -3= 0.25×  (A 550+0.0103) ÷細胞數(shù)量 (萬個)

3   其他樣品:

NO  含量定義:25℃時,每升樣品 15min  生成 moL NO2- ,相當于moL NO。

NO  含量 (μmoL/L) =  (A 550 +0.0103) ÷0.008× V  反總÷V  = 250×  (A 550 +0.0103)   V  :反應(yīng)總體積,0.2mL;V  樣:反應(yīng)中樣品體積,0. 1mL;V  樣總:加入提取液體積, 1mL;W:樣品質(zhì)量,g;Cpr:蛋白濃度,mg/mL

意事項:

1.  試劑盒 2-8℃保存。

2.  盡量使用新鮮樣品進行檢測,試劑三有腐蝕性,操作時請做好防護措施。

3.  若檢測出得 OD  值在標準曲線范圍外,請將樣品進行適當?shù)臐饪s或稀釋,并在計算公式 除以濃縮倍數(shù)或者乘以稀釋倍數(shù)。

4.  最DI檢出限為 0.65μmoL/L。

2011年開始我們致力于在生命科學領(lǐng)域、生物醫(yī)學實驗技術(shù)及論文潤色服務(wù),協(xié)助客戶各類實驗服務(wù)及論文潤色十余年,是客戶您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯(lián)系。

 

實驗技術(shù)服務(wù):

 


會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~

以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負責,化工儀器網(wǎng)對此不承擔任何保證責任。

溫馨提示:為規(guī)避購買風險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。

撥打電話
在線留言
邯郸市| 安宁市| 新津县| 沙河市| 阿拉尔市| 集安市| 海城市| 保亭| 平原县| 德清县| 洪江市| 视频| 青川县| 武山县| 同江市| 丹棱县| 昔阳县| 滨海县| 涡阳县| 云龙县| 达拉特旗| 宜丰县| 界首市| 营口市| 海伦市| 浠水县| 舒城县| 调兵山市| 大埔县| 汤原县| 子洲县| 德化县| 正镶白旗| 台中县| 澄城县| 佳木斯市| 八宿县| 屏东市| 修武县| 昭通市| 平罗县|