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研域(上海)化學(xué)試劑有限公司

豬ELISA試劑盒中樞神系統(tǒng)纖維的再生

時(shí)間:2015-1-19閱讀:1277

 此法采用定量夾心酶聯(lián)免疫技術(shù)。特異性抗體對(duì)于C7已經(jīng)被預(yù)先涂到微孔板。標(biāo)準(zhǔn)和樣品吸入井和任何C7目前的固定抗體的約束。生物素共軛的抗體特異于C7除去任何未結(jié)合的物質(zhì)后,加入到孔中。抗生物素蛋白共軛的辣根過氧化物酶(HRP)的洗滌后,加入到孔中。經(jīng)過洗滌,以除去任何未結(jié)合的抗生物素蛋白的酶試劑,底物溶液加入到孔中,顯色成比例的量的初始步驟中的約束的C7。彩色顯影被停止并測(cè)量的顏色的強(qiáng)度。

1。準(zhǔn)備好所有試劑,工作標(biāo)準(zhǔn)和樣品在前面的章節(jié)中。

2。請(qǐng)確定井?dāng)?shù)的使用,并把任何剩余的井和入袋干燥劑,密封保鮮袋,將未使用的井在4°C的含量布局表

。每孔加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)和樣品。封面用膠粘帶提供。孵育2小時(shí),在37℃下一盤布局記錄標(biāo)準(zhǔn)和樣品檢測(cè)。

4。每孔中取出的液體,不洗。

5。向每孔中加入100μl生物素抗體(1倍)。蓋上一個(gè)新的膠粘帶。孵育1小時(shí),在37℃下(生物素抗體(1X)可能會(huì)出現(xiàn)混濁。預(yù)熱至室溫,輕輕混勻,直到出現(xiàn)均勻解決方案。)

6。吸液的各孔和洗滌,共洗滌三次重復(fù)該過程兩次。洗凈,每孔填充洗滌緩沖液(200μL)使用噴瓶,多道移液器,歧管器,或autowasher,和,靜置2分鐘,*清除液體的每一步是*的良好的性能。zui后一次洗滌后,清除任何剩余洗滌緩沖液的吸ordecanting。倒置板和涂抹對(duì)干凈的紙巾。

7。向每孔中加入100μl的HRP-抗生物素蛋白(1×)。量的微量滴定板,用一個(gè)新的粘接劑條。溫育1小時(shí),在37℃下

8。重復(fù)的愿望/洗滌過??程中,在步驟6的5倍。

9。將90μlTMB底物添加到每個(gè)孔中。孵育15-30分鐘,在37℃下避光

10。一站式解決方案,每孔加入底物,輕輕晃動(dòng)酶標(biāo)板,以確保充分混合。

11。在5分鐘內(nèi),設(shè)置至450nm,使用酶標(biāo)儀測(cè)定各孔的光密度。如果波長(zhǎng)校正,設(shè)置為540nm或570nm處。在540nm或570nm波長(zhǎng)在450nm處的讀數(shù)減去讀數(shù)。該減法校正板的光學(xué)缺陷。在450nm處未經(jīng)修正讀數(shù)直接,可能會(huì)比較高,不太準(zhǔn)確。

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