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酶標(biāo)儀即酶聯(lián)免疫檢測儀是酶聯(lián)免疫吸附試驗的儀器又稱微孔板檢測器。可簡單地分為半自動和全自動2大類,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一個比色計,即用比色法來進(jìn)行分析。 測定一般要求測試液的較為終體積在250μL以下,用一般光電比色計無法完成測試,因此對酶標(biāo)儀中的光電比色計有特殊要求。
酶標(biāo)儀主要應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附檢測反應(yīng)中檢測吸光度值,其用途主要應(yīng)用于ELISA試劑的測定,廣泛用于各種實驗室,包括臨床實驗室。
酶標(biāo)儀測定原理是:在特定波長下,檢測被測物的吸光值。
檢測單位:
光通過被檢測物,前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量,特定波長下,同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。
檢測單位用OD值表示, OD是optical delnsity(光密度)的縮寫,表示被檢測物吸收掉的光密度, OD=1og(1/trans),其中trans為檢測物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則,OD值與光強度成下述關(guān)系:
E=OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度, Ι0 為在檢測物之前的光強度,Ι為從被檢測物出來的光強度。
OD值由下述公式計算:
E=OD=C×D×E
C為檢測物的濃度
D為檢測物的厚度
E為摩爾因子
在特定波長下測定每一種物質(zhì)都有其特定的波長,在此波長下,此物質(zhì)能夠吸收較為多的光能量。如果選擇其它的波長段,就會造成檢測結(jié)果的不準(zhǔn)確。因此,在測定檢測物時,我們選擇特定的波長進(jìn)行檢測,稱為測量波長。
但是每一種物質(zhì)對光能量還存在一定的非特異性吸收,為了消除這種非特異性吸收,我們再選取一個參照波長,以消除這個不準(zhǔn)確性。在參照波長下,檢測物光的吸收較為小。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。
一般使用到酶標(biāo)儀的主要是在食品安全藥物殘留快速檢測中,例如配合北京望爾生物技術(shù)有限公司的克倫特羅、氯霉素、呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、磺胺類、氟喹諾酮類、鏈霉素、青霉素等殘留快速檢測ELISA試劑盒使用時,一般使用酶標(biāo)儀來進(jìn)行定量檢測。
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