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上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司
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| 貨號(hào) | 品名 | 規(guī)格 | 2017年價(jià)格 |
| AChE 100-2 | Fluoro AChE - 100 tests | 100 Tests | 7225 |
產(chǎn)品描述：
保存溫度：2-8度
主要優(yōu)點(diǎn)：
- 無(wú)需放射性物質(zhì)。
- 應(yīng)用 - 流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡。
- 檢測(cè)細(xì)胞水平的細(xì)胞溶解活性。
- 適用于多種類(lèi)型的哺乳動(dòng)物細(xì)胞系。
技術(shù)
測(cè)量CMC / ADCCzui常用的方法是放射性鉻-51（51Cr）釋放試驗(yàn)（2）。該測(cè)定有幾個(gè)缺點(diǎn)：昂貴的，難以加載某些細(xì)胞類(lèi)型，由于嚴(yán)格的環(huán)境規(guī)定而處置昂貴，并且具有51Cr自發(fā)釋放的高背景。使用流式細(xì)胞儀，現(xiàn)在可以消除對(duì)放射性物質(zhì)的需要，并增加在單個(gè)細(xì)胞基底上定量細(xì)胞溶解活性的能力。各組已經(jīng)證明通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)測(cè)量CMC / ADCC活性與傳統(tǒng)的51Cr釋放測(cè)定（3,4,5,6）具有強(qiáng)烈（95％）的相關(guān)性。
測(cè)定原理
細(xì)胞跟蹤染料CFSE（7,8,9）用于標(biāo)記靶細(xì)胞群體。在測(cè)定完成實(shí)驗(yàn)方案后，加入7AAD（活/死）（10,11）以測(cè)量細(xì)胞死亡。7AAD僅進(jìn)入膜受損細(xì)胞并與DNA結(jié)合。
流式細(xì)胞術(shù)用于門(mén)靶細(xì)胞并測(cè)量7AAD陰性對(duì)7AAD后細(xì)胞。％細(xì)胞毒性通過(guò)以下等式計(jì)算（參見(jiàn)下面的實(shí)驗(yàn)例）：
7AAD正（右上象限）= R1 / 7AAD Postitve（右上象限）= R1 + 7AAD負(fù)（右下象限）= R2 ×100
ACT1
為了測(cè)試豬gd淋巴細(xì)胞的自然殺傷能力，將K562細(xì)胞染色并調(diào)整至含有10％FBS的1×10 4個(gè)細(xì)胞/100μlPRMI的終濃度。以25:1,50:1和100:1的E / T比加入gd淋巴細(xì)胞，調(diào)節(jié)至400μlRPMI的總體積，然后在37℃，無(wú)菌封蓋的面管中孵育4小時(shí)。孵育后，將活/死染色劑直接加入每個(gè)管中，在冰上孵育15分鐘并通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)分析。
引用文獻(xiàn)
- a. Perussia, B., (1998). Current Topics in Microbiology and Immunology 230, p63.
b. Whiteside, T.L., Rinaldo, C.R. and Herberman, R.B. (1992) Cytolytic Cellfunctions. In: N.R. Rose, E.C. de Macario (Eds.), Manual of Clinical Laboratory Immunology. American Society for Microbiology. Washington, DC, p. 220. - Brunner, K.T., Manuel, J., Cerotini, J.C., Chapuis, B., (1968). Quantitative Assay of the Lytic Action of Immune Lymphoid Cells on Cr-labelled Allogenic Target Cells in- vitro; Inhibition by Iso-antibody and by Drugs, Immunology 14,181.
- Lee-MacAry, A.E., Ross, E.L, Davies, D., and Wilkinson, R.W., (2001). Development of a Novel Flow Cytometric Cell-mediated Cytotoxcity Assay Using the Fluorophores PKH-26 and TO-PRO-3 Iodide. J. Immunology. Met 252, 83-92.
- Gogoy-Ramirez, K., Franck, K., and Gains, H., (2000). A Novel Method for the Simultaneous Assessment of Natural Killer Cell Conjugate Formation and Cytotoxicity at the Single-cell Level by Multi-parameter Flow Cytometry. Journal of Immunology. Met 239, 35-44.
- Goldberg, J.E., Sherwood, S.W., Clayberger, C., (1999). A Novel Method for Measuring CTL and NK Cell-mediated Cytotoxicity Using Annexin V and Two-color Flow Cytometry. Journal of Immunology. Methods 224, 1.
- Hatam, L,. Schuval, S., Bonagura, V.R., (1994). Flow Cytometric Analysis of Natural Killer Cell Function as a Clinical Assay. Cytometry 16,59.
- L.S De Clerck et al.,J. Immunol. Meth. 172, 115 (1994).
- M. Bronner-Fraser,J. Cell Biol. 101, 610 (1985).
- Rabinovitch, P.S., et al., J. Immunol. 136, 2769 (1986).
- Su, X.,J. Immunol. 156, 156, 4198 (1996).
- Olin, MR. Lee, J. Choi, K, and Molitor, Tw. gd T-lymphocyte Cytotoxic Activity against Mycobaterium bovis Analysed by Flow Cytometry: Journal of Immunological Methods; Publication in process.
- Olin, MR. Thesis, K. Cho, J. and Molitor, T.W. Morphine Suppresses Microglial Directed Cytolytic Activity by gd Lymphocytes. Journal of Neuroimmunology; Publication in process.
