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上海起發(fā)genelink 26-4300-02說明書
Oligo d(T) 5’ Cy3 Labeled
規(guī)格：25微克
運(yùn)輸條件：室溫
儲存溫度-20攝氏度
描述
分別合成和純化不同大小的染料標(biāo)記的寡核苷酸d（T）引物。染料標(biāo)記的低聚d（T）12-18以等摩爾比混合。Oligo dT主要用于通過逆轉(zhuǎn)錄酶啟動合成
使用mRNA作為模板的第一鏈cDNA，用于微陣列雜交協(xié)議。
標(biāo)記為oligo dT的染料經(jīng)過凝膠純化，在-20℃下重新組合儲存后，作為凍干粉末提供。
變性聚丙烯酰胺凝膠電泳測定低聚物純度大于98%。
重建
建議在無核糖核酸酶的DEPC處理水中以50µM（50 pmol/µl）的濃度或10mM Tris pH 8.0進(jìn)行重組。儲備溶液可根據(jù)需要進(jìn)一步稀釋至適當(dāng)?shù)墓ぷ鳚舛取?br/>為了制備50μM的底漆溶液，使用凍干低聚物的“nmol/25μg"值乘以20，以確定要添加的稀釋液體積（微升）。
公式：
“總nmol"x 20=要添加的稀釋劑μl。
-短時間旋轉(zhuǎn)試管，將運(yùn)輸過程中可能卡在瓶蓋中的試管內(nèi)容物卸下。
顆?？赡芊浅Ｐ。豢梢?。
-直接向試管中加入適量的無核糖核酸酶水或10mM Tris pH 8.0。旋渦。
-上述溶液為50µM。這相當(dāng)于50 pmol/µl。
熒光標(biāo)記探針應(yīng)避光，以避免光漂白。
在零下20點(diǎn)儲存
重建后C或以下。
推薦用法
在20µl反應(yīng)體積中，使用2µl含有1µg聚（A）+RNA的50µM溶液作為模板。
詳見反應(yīng)條件。
質(zhì)量控制數(shù)據(jù)
該產(chǎn)品被證明能以聚（A）+RNA為模板引發(fā)第一鏈cDNA合成反應(yīng)。
功能分析條件
下面給出的條件已經(jīng)過測試，以產(chǎn)生第一鏈cDNA合成，并給出了一個例子。
使用該產(chǎn)品的其他實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)使用了各種變體和其他方案，以產(chǎn)生出色的第一鏈合成。研究人員可以替代他們自己的反應(yīng)條件。
RNA的質(zhì)量對逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)非常重要。必須有完整的全長RNA作為模板材料，不含微量RNA酶和污染性化學(xué)物質(zhì)。
低質(zhì)量的RNA模板通常是導(dǎo)致cDNA產(chǎn)物截短和不完整的原因。
按照下面給出的順序添加組件。反應(yīng)體積可以放大。
