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技術(shù)文章

大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)elisa試劑盒手冊

閱讀:750          發(fā)布時間:2022-9-7

大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)檢測范圍:

10ng/L -340ng/L

大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)使用目的:

本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)含量。

大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)實驗原理:

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)水平。用純化的大鼠CRF抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF),再與HRP標記的CRF抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)濃度。

大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)標本要求 :

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)計算:

以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。

與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。

大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)注意事項:

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。

3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

4. 請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請避光保存。

7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。

大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)保存條件及有效期:

1.試劑盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6個月

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