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判定ELISA試劑盒實驗結果常用方法

閱讀:1514          發(fā)布時間:2016-1-11

ELISA法實驗現(xiàn)已普遍運用于科研領域,其實驗原理:用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗C3抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗C3抗體、HRP標記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的C3呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。

當我們將實驗的一切都準備好并且即將完畢時,要如何去判定ELISA試劑盒實驗結果呢?這里給您總結出了三個方法,分別是定量測定、半定量測定、定性測定,下面就來看看吧。
1、定量測定:用己知量的標準品作一系列稀釋后進行ELISA測定,與待測標本同時進行測定,繪制標準曲線,結果以量或活性單位表示之。
2、半定量測定:結果一般以滴度表示。將標本連續(xù)稀釋后,進行ELISA檢測,在陽性臨界值以上的zui高稀釋度即為該標本的“滴度”。
3、定性測定
(1)陽性判定值法(cut-off value,CO值):一般為陰性對照的平均A值加一個常數(shù),試劑制備嚴格標準化,要先計算出陽性對照A值平均數(shù)和陰性對照A值平均數(shù)。標本A值≥CO值即為陽性。
(2)抑制率法:在競爭抑制法中+結果可用抑制率表示。抑制率(%)=(A陰性對照A- A待測)/陰性對照X100%,一般以抑制率≥50%為陽性。

更多ELISA試劑盒實驗技術問題,咨詢上海恒遠工作人員!

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