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不同化學(xué)轉(zhuǎn)染方法的優(yōu)點與缺點是什么?

時間:2024/5/13閱讀:498
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化學(xué)法轉(zhuǎn)染技術(shù)已廣泛應(yīng)用于細(xì)胞的穩(wěn)定或瞬時轉(zhuǎn)染,那么你知道不同化學(xué)轉(zhuǎn)染方法的優(yōu)點與缺點是什么嗎?讓我們一起來看看吧!

一、陽離子脂質(zhì)體

優(yōu)點:

1.操作快速簡單。

2.結(jié)果可重復(fù)。

3.轉(zhuǎn)染效率高。

4.可轉(zhuǎn)染DNA,RNA和蛋白質(zhì)。

5.適用于生產(chǎn)瞬時和穩(wěn)定的蛋白質(zhì)。

6.可用于體內(nèi)轉(zhuǎn)染。

缺點:

1.需進行條件優(yōu)化(一些細(xì)胞系對陽離子脂質(zhì)體較敏感)。

2.有些細(xì)胞系不容易轉(zhuǎn)染。

3.血清的存在干擾復(fù)合物的形成,導(dǎo)致低轉(zhuǎn)染效率。

4.培養(yǎng)基中血清的缺失會增加細(xì)胞毒性。

二、磷酸鈣共沉淀

優(yōu)點:

1.便宜且容易獲得。

2.適用于生產(chǎn)瞬時和穩(wěn)定的蛋白質(zhì)。

3.轉(zhuǎn)染效率高(不限制細(xì)胞系)。

缺點:

1.需要仔細(xì)制備試劑  CaPO4溶液對pH,溫度和緩沖鹽濃度的變化敏感。2.可重復(fù)性較差。

3.有細(xì)胞毒性,尤其對原代細(xì)胞。

4.不能采用RPMI培養(yǎng)基,由于其含高濃度的磷酸鹽。

5.不適用于動物體內(nèi)轉(zhuǎn)染。

三、葡聚糖:

優(yōu)點:

1.操作簡單。

2.結(jié)果可重復(fù)。

3.便宜。

缺點:

1.對某些細(xì)胞有化學(xué)毒性。

2.只限于瞬時轉(zhuǎn)染。

3.轉(zhuǎn)染效率低,尤其在原代細(xì)胞中。

四、其他陽離子聚合物

優(yōu)點:

1.在血清中穩(wěn)定,對溫度不敏感。

2.高轉(zhuǎn)染效率(限制細(xì)胞系)。

3.結(jié)果可重復(fù)。

缺點:

1.對某些細(xì)胞有毒性。

2.不能生物降解(樹枝狀大分子)。

3.只限于瞬時轉(zhuǎn)染。


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