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不同化學轉染方法的優(yōu)點與缺點是什么?

時間:2024/5/13閱讀:499
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化學法轉染技術已廣泛應用于細胞的穩(wěn)定或瞬時轉染,那么你知道不同化學轉染方法的優(yōu)點與缺點是什么嗎?讓我們一起來看看吧!

一、陽離子脂質體

優(yōu)點:

1.操作快速簡單。

2.結果可重復。

3.轉染效率高。

4.可轉染DNA,RNA和蛋白質。

5.適用于生產瞬時和穩(wěn)定的蛋白質。

6.可用于體內轉染。

缺點:

1.需進行條件優(yōu)化(一些細胞系對陽離子脂質體較敏感)

2.有些細胞系不容易轉染。

3.血清的存在干擾復合物的形成,導致低轉染效率。

4.培養(yǎng)基中血清的缺失會增加細胞毒性。

二、磷酸鈣共沉淀

優(yōu)點:

1.便宜且容易獲得。

2.適用于生產瞬時和穩(wěn)定的蛋白質。

3.轉染效率高(不限制細胞系)。

缺點:

1.需要仔細制備試劑  CaPO4溶液對pH,溫度和緩沖鹽濃度的變化敏感。2.可重復性較差。

3.有細胞毒性,尤其對原代細胞。

4.不能采用RPMI培養(yǎng)基,由于其含高濃度的磷酸鹽。

5.不適用于動物體內轉染。

三、葡聚糖:

優(yōu)點:

1.操作簡單。

2.結果可重復。

3.便宜。

缺點:

1.對某些細胞有化學毒性。

2.只限于瞬時轉染。

3.轉染效率低,尤其在原代細胞中。

四、其他陽離子聚合物

優(yōu)點:

1.在血清中穩(wěn)定,對溫度不敏感。

2.高轉染效率(限制細胞系)。

3.結果可重復。

缺點:

1.對某些細胞有毒性。

2.不能生物降解(樹枝狀大分子)。

3.只限于瞬時轉染。


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