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熒光定量PCR對使用環(huán)境的要求有什么？
閱讀：234 發(fā)布時間：2022-11-8
熒光定量PCR是指在PCR擴增反應體系中加入熒光基團，通過對擴增反應中每一個循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的實時檢測,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。具有靈敏度高，特異性強，能實現(xiàn)多重反應，據(jù)實時性和準確性等特點，廣泛應用于分子生物學研究和醫(yī)學研究等領域。
熒光定量PCR實驗原理介紹：
將標記有熒光素的探針與模板DNA混合后，完成高溫變性、低溫復性、適溫延伸的熱循環(huán)，并遵守聚合酶鏈反應規(guī)律，與模板DNA互補配對的探針被切斷，熒光素游離于反應體系中，在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光；隨著循環(huán)次數(shù)的增加，被擴增的目的基因片段呈指數(shù)規(guī)律增長，通過實時檢測與之對應的隨擴增而變化熒光信號強度，求得Ct值，同時利用數(shù)個已知模板濃度的標準品作對照，即可得出待測標本目的基因的拷貝數(shù)。
熒光定量PCR使用環(huán)境的要求：
儀器應安放在灰塵較少并遠離水源和熱源的地方，無腐蝕性氣體或強磁場干擾。
同一環(huán)境內(nèi)放置多臺儀器時，儀器之間應保持50cm 以上距離，降低儀器之間的影響。
為保護儀器電路和保證試驗結果，儀器建議通過穩(wěn)壓器和UPS（不間斷電源）后連接電源。
請勿和其它大功率器件如離心機、空調(diào)等共用同一個電源插座以免電源電壓波動影響系統(tǒng)運行。