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技術(shù)文章

上海恒遠(yuǎn)為您分享ELISA試劑盒的洗滌參數(shù)

閱讀:1312          發(fā)布時(shí)間:2021-2-23

       優(yōu)化ELISA的重點(diǎn)之一在于洗滌。洗滌步驟可降低未結(jié)合抗體所引起的背景信號(hào),從而增加分析的信噪比。而不充分的洗滌會(huì)導(dǎo)致差異和高背景,從而帶來不理想的結(jié)果。今天上海恒遠(yuǎn)將為大家分享:ELISA試劑盒的洗滌參數(shù)。

 
第yi、洗滌量
      自動(dòng)洗板機(jī)會(huì)分配洗滌液。如果你之前遭遇過高背景,那么不要猶豫,將洗滌量調(diào)為高,比包被體積更高。太少的洗滌液會(huì)讓一部分分析表面洗滌不到,從而明顯增加背景。所有反應(yīng)孔的洗滌量必須相同。ELISA板的商通常會(huì)在試劑盒的使用手冊(cè)中列出包被量。行業(yè)中通常使用的包被量是200μl。如果你的試劑盒也是這樣,那么商可能會(huì)建議使用300μl洗滌液進(jìn)行洗滌,以便清潔整個(gè)反應(yīng)孔的壁。一般來說,洗滌量越高,則孵育步驟殘留的抗體或抗原量就越少。
 
 
第二、洗滌循環(huán)的量
       Elisa試劑盒洗滌次數(shù)越多,背景越低。然而,太多次的洗滌會(huì)降低信號(hào)強(qiáng)度,使其難以測(cè)定。通常的做法是在每次抗體或抗原孵育后重復(fù)洗滌三次。不過,ELISA板的商會(huì)對(duì)洗滌次數(shù)提出建議。一般而言,商包被平板需要的洗滌次數(shù)比用戶包被的平板要少。對(duì)于用戶包被的ELISA板,必須優(yōu)化洗滌次數(shù)。
 
      控制洗滌量和洗滌次數(shù)的另一種方法是加入過量的洗滌液。一般來說,96孔板的每個(gè)孔能容納330至460μl。不過,有些自動(dòng)化洗板機(jī)可設(shè)置程序,分配遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出這個(gè)量的洗滌液,比如1ml。它是如何做到的呢?其實(shí)很簡(jiǎn)單,就是在分液的同時(shí)打開吸液功能。換句話說,隨著分液器分配更多的液體,抽吸器也將液體吸出。這種技術(shù)能增加洗滌量,但不會(huì)溢出到其他孔中。
                
       以上如果您還有什么疑問,可咨詢我司技術(shù)部。上海恒遠(yuǎn)生我科技有限公司ELISA試劑盒質(zhì)量穩(wěn)定,價(jià)格經(jīng)濟(jì)實(shí)惠,歡迎咨詢。

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