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技術(shù)文章

如何驗證ELISA酶標(biāo)板可靠性

閱讀:1565          發(fā)布時間:2021-3-10

有操作員反應(yīng):做了很多次ELISA實驗,每次都能夠得到線性比較好的標(biāo)準(zhǔn)曲線,但是同樣濃度的標(biāo)準(zhǔn)品每次的OD值都不一致,猜可能是酶標(biāo)板的問題,有什么方法可以快速驗證酶標(biāo)板的可靠性嗎?

    我公司實驗技術(shù)專員解讀【ELISA酶標(biāo)板可靠性】的驗證原理:
    ELISA本身靈敏性很高,每次做出來的值不一樣很正常,特別是od值比較大的時候更是差別很大,但是只要不要偏差太大就好,一般偏差要求10%內(nèi)吧,好的數(shù)據(jù)是3%內(nèi)。
 
    首先要穩(wěn)定所有的條件,不同的條件下做的板子讀值不一樣很正常。在同樣條件下同批次的板子,如果測定不一樣,就是包被問題或者保護(hù)劑的問題,但這兩個都是各個試劑盒的機(jī)密,看看文獻(xiàn)里別人怎么做的。
 
    其次每次實驗的標(biāo)曲上同一濃度樣品的OD值不一樣是很正常的,這與抗原抗體反應(yīng)體系、作用時間、顯色時間等等一系列的因素有關(guān)。鑒定該ELISA體系是否可靠,關(guān)鍵的指標(biāo)是加標(biāo)回收率和稀釋線性,如果你懷疑的話可以做一下。
 
    一般來說,國外廠商的ELISA試劑盒是沒有問題的。同時你還要看一下說明書中ELISA試劑盒的靈敏度,如果樣品濃度低于該檢測下限,則無法檢測到,這是很正常的現(xiàn)象,并不是非要每個樣品都要測出值才可以。

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