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上海恒遠生物科技有限公司>公司動態(tài)>肺炎支原體lgM檢測

公司動態(tài)

肺炎支原體lgM檢測

閱讀:1430          發(fā)布時間:2012-9-11

【原理】 肺炎支原體快速檢測卡可檢測血清中的肺炎支原體lgM抗體?;颊叩难鍢悠贩謩e加入兩個測試孔內(nèi),當樣品沿膜擴散時,分別加入3滴抗人lgM堿性磷酸酶復合物、3滴洗液和2滴底物,5分鐘后觀察結(jié)果。質(zhì)控孔為質(zhì)量控制,固定有人lgM,測試孔固定有肺炎支原體抗原。陽性反應結(jié)果為藍色,陰性結(jié)果為無色。

【材料】

1、患者血清。

2、肺炎支原體lgM檢測試劑盒,包括:

(1)檢測卡:單獨錫紙包裝,卡上固定有肺炎支原體抗原或人lgM(質(zhì)控孔)。

(2)陽性質(zhì)控液(1.7ml):含有人抗肺炎支原體lgM的0.1%疊氮鈉緩沖液。

(3)陰性質(zhì)控液(1.7ml):0.1%疊氮鈉緩沖液。

(4)酶結(jié)合物:(11ml):含有以堿性磷酸酶標記的抗人lgM單克隆抗體的0.1%疊氮鈉緩沖液。

(5)洗液:9.5%(W/V)的呱基氫氯酸。

(6)底物(15ml):含有5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸的0.1%疊氮鈉的緩沖液。

(7)移液管。

【樣本處理】血清樣品2—8℃可保存3天,如果不能在此期間測試,-20℃保存,樣品不宜反復凍融。

【操作】

1、從冰箱中取出試劑盒,置室溫平衡20分鐘。

2、從錫紙袋中取出檢測卡,作好標記。

3、用移液管滴加2滴血清到卡下端兩個測試孔中。

4、22—25℃下孵育2分鐘。2分鐘內(nèi)血清應沿膜擴散至上端的測試孔中。

5、加入3滴酶結(jié)合物到下端兩個測試孔中,22—25℃下孵育2分鐘,酶結(jié)合物應沿膜擴散至上端的測試孔中。

6、加入3滴洗液到上端兩個測試孔中,等待*吸收。

7、滴加2滴底物試劑到上端兩個測試孔,22—25℃下孵育5分鐘,5分鐘后立即觀察反應結(jié)果。

【結(jié)果】  根據(jù)上端兩個反應孔的反應結(jié)果判斷:

陽性結(jié)果:上端兩孔都出現(xiàn)藍色。提示肺炎支原體性lgM存在。

陰性結(jié)果:質(zhì)控孔出現(xiàn)藍色或輕微藍色,測試孔無色或呈暗灰色,提示不存在肺炎支原體lgM或其濃度在檢測下限之下。

無效反應:質(zhì)控孔不出現(xiàn)藍色。產(chǎn)生無效反應的可能原因為:試劑或檢測卡質(zhì)量問題,操作不當,樣品擴散不好,酶結(jié)合物嚴重污染,血清中含有過多脂質(zhì)成分等。無污染血清可離心后再次測試 。

【特異性】該試劑盒與下列因素不發(fā)生交叉反應:腺病毒、風濕因子、呼吸道合胞病毒、抗核抗體、流感病毒A型和B型、副流感病毒3型、組織胞漿菌、巨細胞病毒等。

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