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上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司>公司動態(tài)>2016ELISA試劑盒檢測解說方法

公司動態(tài)

2016ELISA試劑盒檢測解說方法

閱讀:752          發(fā)布時間:2015-12-28

     時間過的真快啊!今天是本年度的zui后一個周一了,上海恒遠(yuǎn)技術(shù)部根據(jù)產(chǎn)品的原理與特性,分析解說2016ELISA試劑盒檢測方法:
     首先我們要從抗體的酶標(biāo)記及質(zhì)量鑒定、抗原濃度的優(yōu)化、洗滌液及保護(hù)液的優(yōu)化、酶標(biāo)抗體稀釋度的優(yōu)化、底物液的優(yōu)化、底物作用時間的優(yōu)化,然后比較結(jié)果。
     1. 抗體的酶標(biāo)記及質(zhì)量鑒定
     試劑盒收集*峰即為酶標(biāo)抗體峰。標(biāo)記完后用紫外分光光度計在分別在280nm、及403nm處測定酶標(biāo)記物的A值,計算免疫球蛋白量、摩爾比值、酶結(jié)合率以及標(biāo)記率。
     2. 包被用緩沖液及zui適包被抗原濃度的優(yōu)化
     ① 包被緩沖液的優(yōu)化:三種緩沖液作為包被液,抗原包被濃度為5ug/ml,及2.5ug/ml,酶標(biāo)抗體工作濃度為1:400及1:300,用自動酶標(biāo)儀分析,選擇*的包被緩沖液系統(tǒng)。
     ② zui適抗原包被濃度的優(yōu)化:顯色的強(qiáng)度在一定范圍內(nèi)與包被的抗原量成正比,但隨著包被抗原濃度的增加,顯色的強(qiáng)度反而降低,我們選擇臨界包被值作為包被抗原量。
     3. 封閉液、洗滌液及保護(hù)液的優(yōu)化
     ① 封閉液的優(yōu)化:采用文獻(xiàn)報道的方法進(jìn)行封閉,其封閉液的組成為:10mM磷酸鹽緩沖液含1%的牛血清白蛋白。
     ② 洗滌液的配制:采用文獻(xiàn)報道的方法配制洗滌液。
     4. 酶標(biāo)板保護(hù)液的優(yōu)化
     在封閉完后加入保護(hù)液于4℃冰箱中孵育放置一個晚上,同時與未做保護(hù)的酶標(biāo)板進(jìn)行對照,然后將保護(hù)的及未保護(hù)的酶標(biāo)板置于37烘箱中放置15天,考察保護(hù)液對酶標(biāo)板的穩(wěn)定性的影響。
     5. 酶標(biāo)抗體稀釋度、保護(hù)液的優(yōu)化
     ① 稀釋度的優(yōu)化:抗原包被濃度為4ug/ml,經(jīng)孵育、洗滌后、顯色終止后,用自動酶標(biāo)儀分析,選擇A值為1.5左右的酶標(biāo)抗體稀釋度為zui適工作濃度。
     ② 保護(hù)液的優(yōu)化:適當(dāng)?shù)木彌_液以及添加無關(guān)蛋白質(zhì)、糖、防腐劑以及一些含氨基的化合物等都會對對酶標(biāo)抗體的活性起一定的保護(hù)作用,因此我們設(shè)計了一組保護(hù)劑用于保護(hù)酶標(biāo)抗體,與未添加任何糖蛋白的酶標(biāo)抗體做對照。
      以上就是2016ELISA試劑盒檢測方法啦,希望能在您的實(shí)驗中給予實(shí)際的幫助。非常感謝您在2015對我司的大力支持,現(xiàn)在2016元旦活動進(jìn)行中,采購。

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