国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

產(chǎn)品展廳收藏該商鋪

您好 登錄 注冊(cè)

當(dāng)前位置:
上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司>技術(shù)文章>糖基轉(zhuǎn)移酶活性分析

技術(shù)文章

糖基轉(zhuǎn)移酶活性分析

閱讀:1882          發(fā)布時(shí)間:2012-7-11

R&D Systems現(xiàn)已開(kāi)發(fā)出一種多功能的非放射性檢測(cè)方法,能測(cè)定糖基轉(zhuǎn)移酶活性。分析使用了一種特定的磷酸酶,它釋放糖基轉(zhuǎn)移酶反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的核苷酸上的磷酸。隨后利用孔雀石綠磷酸鹽檢測(cè)試劑來(lái)評(píng)估磷酸鹽水平。因?yàn)獒尫诺牧姿猁}濃度與轉(zhuǎn)移的糖分子量成正比,所以可測(cè)定糖基轉(zhuǎn)移酶的動(dòng)力學(xué)參數(shù)。此外,這種顯色分析在96孔板中開(kāi)展,適合高通量研究

 糖基轉(zhuǎn)移酶是催化單糖基團(tuán)從糖基供體向受體底物轉(zhuǎn)移的酶。其中大部分被歸為L(zhǎng)eloir酶,它們利用核苷酸糖作為供體,并在反應(yīng)中核苷酸磷酸鹽。分析糖基轉(zhuǎn)移酶活性相當(dāng)具有挑戰(zhàn)性。zui常用的方法是檢測(cè)放射性標(biāo)記的糖從供體轉(zhuǎn)移到受體分子。各種非放射性的檢測(cè)方法也被不斷開(kāi)發(fā);然而,它們中的大部分是為特定糖基轉(zhuǎn)移酶定制的。

為了證明這種技術(shù)的實(shí)用性,我們?cè)u(píng)估了Clostridium difficile毒素B(TcdB;圖2A)、人O-糖基轉(zhuǎn)移酶I(KC1;圖2B)和人ST6GAL1(圖2C)的酶活。TcdB和KC1是具有UDP-葡萄糖水解酶活性的糖基轉(zhuǎn)移酶,它們?cè)诜磻?yīng)中副產(chǎn)物UDP。磷酸酶CD39L3水解核苷酸β-磷酸鹽,并從UDP上釋放出游離的磷酸鹽。相比之下,ST6GAL1是唾液酸轉(zhuǎn)移酶,它催化了N聚糖中唾液酸從α2,6轉(zhuǎn)移到β 1-4GlcNAc結(jié)構(gòu)。對(duì)于此反應(yīng),CMP-NeuAc充當(dāng)供體底物,而N-乙酰乳糖胺(LN)則充當(dāng)受體。利用5’核苷酸酶CD73從反應(yīng)中產(chǎn)生的CMP上釋放出游離的磷酸鹽。對(duì)于這三種糖基轉(zhuǎn)移酶的反應(yīng),利用孔雀石綠檢測(cè)試劑測(cè)定游離磷酸鹽水平,以獲得相對(duì)供體底物濃度的特定活性(pmol/min/µg)的準(zhǔn)確測(cè)定(圖2)。

收藏該商鋪

請(qǐng) 登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~

對(duì)比框

產(chǎn)品對(duì)比 產(chǎn)品對(duì)比 聯(lián)系電話 二維碼 意見(jiàn)反饋 在線交流

掃一掃訪問(wèn)手機(jī)商鋪
在線留言
吉水县| 苍溪县| 章丘市| 高陵县| 锡林郭勒盟| 荆州市| 关岭| 乌兰县| 南川市| 福泉市| 青神县| 常州市| 应用必备| 黑山县| 革吉县| 鱼台县| 白朗县| 扶余县| 保康县| 蒲城县| 乐东| 长子县| 蛟河市| 黄冈市| 蕉岭县| 黄梅县| 古田县| 平阳县| 阿荣旗| 阳曲县| 长阳| 江津市| 苍山县| 垣曲县| 九龙坡区| 拉萨市| 福建省| 诸暨市| 张家口市| 洛南县| 太仆寺旗|