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ELISA技術課題:標準品的稀釋方法

閱讀:4761          發(fā)布時間:2016-11-8

ELISA標準曲線是結果計算的尺子,標準品是ELISA 實驗成功與否的關鍵點。怎樣正確溶解、稀釋標準品呢?
1. 粉末標準品短暫離心,讓因運輸沾到管蓋、管壁的標準品沉到管底。
2. 根據(jù)瓶標簽加入一定體積的蒸餾水,加水后輕柔渦旋震蕩,室溫靜置溶解 10-30min,讓粉末*溶解。
    注意:加水后暫不用移液槍吹吸,避免蛋白未溶解,槍頭帶出部分蛋白,待*溶解后可吹吸或渦旋振蕩混勻。
3. 標準品梯度稀釋:
(1)標準品稀釋液的選擇:

若血清、血漿、組織勻漿樣本,用試劑盒中的標準品稀釋液,梯度稀釋標準品。

若細胞上清樣本,建議用細胞培養(yǎng)基梯度稀釋標準品。

(2)耗材準備:準備8個1.5Ml離心管,寫上S1-S7、空白。

(3)梯度稀釋:根據(jù)說明書,每管加入等體積的標準品稀釋液(培養(yǎng)基)。吸取同體積溶解好的標準品到S1管中,吹打10次混勻,渦旋5S。從S1管中吸取同體積溶液到 S2管,吹打10次混勻,渦旋5s。同法稀釋S3-S7濃度。

(4)空白: 標準品稀釋液(培養(yǎng)基)作為空白即零濃度。

注意:梯度稀釋標準品時,渦旋震蕩混勻后可短暫離心,讓到蓋子、壁上的液體到管底,再開始稀釋下個濃度。

標準品溶解、梯度稀釋是ELISA實驗關鍵點,按以上方法梯度稀釋就可,以下是我們的ELISA標準操作視頻,可供大家參考。

上海恒遠生物科技有限公司長期提供各種種屬各種系列ELISA檢測試劑盒,用于科研檢測。種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊;標本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水等等;各種標本、種屬、具體指標齊全。

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