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技術(shù)文章

常見的酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)問題您不知道?

閱讀:2408          發(fā)布時(shí)間:2016-12-20


    在操作酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí),有很多技術(shù)問題是比較常見且易錯(cuò)的,而就是這些問題困惑不少實(shí)驗(yàn)操作員。上海恒遠(yuǎn)根據(jù)技術(shù)部的問題處理總結(jié),這些常見的酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)問題您也在問?
一、為什么必須設(shè)置復(fù)孔?
     為獲得更準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,強(qiáng)烈建議標(biāo)準(zhǔn)品及樣本進(jìn)行復(fù)孔檢測,因?yàn)閺?fù)孔檢測可以:計(jì)算平均值,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果更準(zhǔn)確;解決實(shí)驗(yàn)中誤操作造成的跳孔現(xiàn)象;計(jì)算CV值,對實(shí)驗(yàn)的操作和試劑盒的精密度進(jìn)行評估。
二、重復(fù)性差怎么辦?
    1.樣品數(shù)量不一,加樣時(shí)間長短不一(恒遠(yuǎn)來解決:重復(fù)某一樣品時(shí),加樣時(shí)間盡可能與*次接近)。
    2.酶標(biāo)儀濾光片不對或輸入波長不對(恒遠(yuǎn)來解決:TMB顯色用450/630波長)。
    3.酶標(biāo)儀測定重復(fù)性差(恒遠(yuǎn)來解決:校對酶標(biāo)儀)。

三、為什么標(biāo)準(zhǔn)曲線線性較差 
    需要按照推薦方式保存標(biāo)準(zhǔn)品;溶解標(biāo)準(zhǔn)品之前需短暫離心,*收集粉末;確保標(biāo)準(zhǔn)品*溶解和混勻,然后再進(jìn)行后續(xù)的系列稀釋步驟,確保每一步都充分混勻且移液;顯色的恰當(dāng)終止;選擇合適的數(shù)學(xué)擬合方程繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
四、為什么所有試劑和檢測樣本要平衡至室溫后再進(jìn)行加樣操作 
    溫度是ELISA結(jié)合反應(yīng)的重要影響因素。為了使所有樣本在一致的溫度下反應(yīng),實(shí)驗(yàn)前務(wù)必將所有試劑平衡至室溫,包括檢測樣本。避免因溫度的動力學(xué)反應(yīng)差異而導(dǎo)致ELISA檢測結(jié)果的不準(zhǔn)確。
    今天的資訊內(nèi)容就到這里了,上海恒遠(yuǎn)生物公司為您提供的酶聯(lián)免疫試劑盒安全可靠,規(guī)格有96T和48T兩種,主要代理品牌有美國非常的R&D、BIM,歡迎您電詢我司產(chǎn)品。 

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